[发明专利]重组肠道病毒71型病毒VP1抗原的纯化方法有效
| 申请号： | 201010202876.6 | 申请日： | 2010-06-17 |
| 公开（公告）号： | CN101857871A | 公开（公告）日： | 2010-10-13 |
| 发明（设计）人： | 吴强;周林福 | 申请（专利权）人： | 杭州浙大紫金生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/41 | 分类号： | C12N15/41;C12N15/70;C07K14/085;C07K1/22 |
| 代理公司： | 杭州中成专利事务所有限公司 33212 | 代理人： | 金祺 |
| 地址： | 310013 浙江省杭州*** | 国省代码： | 浙江;33 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及基因工程重组蛋白的纯化方法，旨在提供一种重组肠道病毒71型病毒VP1抗原的纯化方法。该方法包括：利用大肠杆菌表达生产重组肠道病毒71型病毒VP1蛋白，得到该蛋白的包涵体；将包涵体溶解于增溶液中；在水浴和磁力搅拌条件下向复性液中逐滴加入包涵体溶液，然后在搅拌复性48小时。本发明提出通过蛋白复性能使以包涵体形式存在的蛋白变成可溶性蛋白，大大提高了表达产物的回收率。采用亲和层析一步纯化，纯度大于95％。纯化的方法操作简单、方便、省时，有利于大规模的工业化生产。具有成本低廉、工艺简便，纯化蛋白纯度高等优点，可以为EV71型诊断试剂的开发和血清流行病学调查提供诊断用抗原。 | ||
| 搜索关键词： | 重组 肠道病毒 71 病毒 vp1 抗原 纯化 方法 | ||
【主权项】：
一种重组肠道病毒71型病毒VP1抗原的纯化方法，包括以下步骤：(1)利用大肠杆菌表达生产重组肠道病毒71型病毒VP1蛋白，得到该蛋白的包涵体；(2)按每1g包涵体∶15ml增溶液的比例，将包涵体溶解于增溶液中；所述增溶液的pH值为8.5，其组成及配比浓度为：盐酸胍4～6M、EDTA 1～10mM、Tris 5～20mM，余量为H2O；(3)在20～25℃的水浴和磁力搅拌条件下，向复性液中逐滴加入包涵体溶液，使复性液中的VP1蛋白浓度控制在0.1～1mg/ml；然后在15℃搅拌复性48小时；所述复性液的pH值为7.2，其组成及配比浓度为：PB 5～20mM，Arg 0.1～1mol/L，浓度为1～20％且分子量为5000～30000道尔顿的PEG。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于杭州浙大紫金生物科技有限公司，未经杭州浙大紫金生物科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201010202876.6/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种适用于大田作物的缓释控释复混肥料
- 下一篇：一种来电自动拒接的方法和装置
