[发明专利]一种量子点免疫荧光探针的制备方法

摘要

本发明提供一种量子点免疫荧光探针的制备方法，水溶性量子点标记的单克隆抗体荧光探针是在羧基化修饰的量子点末端共价连接单克隆抗体，通常每个量子点可以连接一个或者一个以上的抗体分子，其制备方法是先在水溶液中利用水热法制得巯基丙酸修饰的量子点，再通过共价偶联的方法使羧基修饰的量子点连接抗体蛋白，得到既有良好的荧光特性又有优异的生物活性的量子点免疫荧光探针。同现有技术比较，本发明的优点是：该探针分散性好、特异性强、荧光强度大且耐光漂白，可应用于与免疫检测、细胞信号转导、生物细胞或组织的荧光成像技术等相关生物医学研究领域。该方法简单易行，可在一般的生物、化学实验室完成。

主权项

一种量子点免疫荧光探针的制备方法，其特征在于采用如下步骤：A)用浓度为0.2mol/L，pH值为7.2 7.6的磷酸盐缓冲液溶解1 乙基 3 (3 二甲氨丙基)碳二亚胺和N 羰基琥珀酸亚胺，配制成羧基活化剂，活化剂中1 乙基 3 (3 二甲氨丙基)碳二亚胺和N 羰基琥珀酸亚胺的浓度均为50mg/mL，将该活化剂按体积比1∶8加入至浓度为1mg/mL市售羧基化量子点中，在室温下轻微振荡使羧基活化形成活泼酯，经高速离心机分离使量子点沉降，弃去上清液；B)往步骤A)的量子点沉淀中加入A)中使用的磷酸盐缓冲液，在涡旋振荡器上轻微振荡使量子点重新悬浮至A)加入活化剂后的体积，再高速离心机分离及重悬，照此重复2次，再次高速离心使量子点沉降；C)加入浓度为1mg/mL的抗体溶液，轻微振荡使量子点在抗体溶液中重新悬浮至步骤A)中加入活化剂后的体积，并使抗体与羧基活化的量子点充分接触，发生共价偶联反应，在室温下放置1h，每隔20min轻微振荡一次，1h后经低速离心机分离使形成的量子点团块沉降，所得上清液即为量子点免疫荧光探针。