[发明专利]玫瑰孢链霉菌基因工程菌的构建方法及其应用有效
| 申请号： | 201010236729.0 | 申请日： | 2010-07-26 |
| 公开（公告）号： | CN102146414A | 公开（公告）日： | 2011-08-10 |
| 发明（设计）人： | 闻建平;宇光海;贾晓强 | 申请（专利权）人： | 天津大学 |
| 主分类号： | C12N15/52 | 分类号： | C12N15/52;C12N15/76;C12N1/21;C12P21/02;C12R1/465 |
| 代理公司： | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人： | 王丽 |
| 地址： | 300072 天*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明提供了玫瑰孢链霉菌基因工程菌的构建方法及其应用，克隆达托霉素合成基因簇中非核糖体蛋白合成酶(NRPS)基因上下游附属关键基因dptE、dptF、dptG、dptH、dptI、dptJ，利用大肠杆菌-链霉菌穿梭质粒表达载体构建重组质粒。将重组质粒导入大肠杆菌ET12567中，将ET12567与玫瑰孢链霉菌共培养，通过结合转移的方法转化玫瑰孢链霉菌，然后通过安普霉素抗性筛选转化子，通过PCR进一步确认。本发明构建的玫瑰孢链霉菌基因工程菌可直接用于达托霉素的工业化生产，可提高产量降低成本。 | ||
| 搜索关键词： | 玫瑰 霉菌 基因工程 构建 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
达托霉素基因工程菌的构建方法，其特征是利用PCR扩增NPRS上下游附属关键基因dptE、dptF、dptG、dptH、dptI、dptJ，将基因片段连接到过表达载体，然后利用结合转移的方法转化玫瑰孢链霉菌，通过抗生素抗性筛选获得目的基因工程菌。
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