[发明专利]利用Flp-Frt系统建立嵌套型组织特异性表达的Cre工具鼠无效
| 申请号： | 201010263397.5 | 申请日： | 2010-08-26 |
| 公开（公告）号： | CN102373237A | 公开（公告）日： | 2012-03-14 |
| 发明（设计）人： | 徐静悦;唐安;康迪;高翔 | 申请（专利权）人： | 南京大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/64;A01K67/027 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 210093 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 传统的Cre转基因很难做到很精确的组织特异性表达。本发明基于双转基因和Flp-Frt技术进行了创新。首先，在Cre的翻译起始密码子前加入一个“STOP“原件，可以抑制下游Cre的表达。在“STOP“原件的上下游各加上一个Frt序列。其次，利用Flp重组酶，可以特异的删除两个FRT序列间的“STOP“原件，这时其下游的Cre重组酶可以表达。在Cre和Flp的表达质粒前各加上组织特异性的启动子，只有在这两个启动子都表达的组织Cre才会表达。其有益效果是对传统的组织特异性Cre转基因载体的构建方法上进行了改良与创新。用两个特异性的启动子的交集来标定Cre的正确组织特异性与时间特异性，促进了利用条件性基因敲除小鼠对基因功能的研究，以进一步应用于医学和药物靶点的研究。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 flp frt 系统 建立 嵌套 组织 特异性 表达 cre 工具 | ||
【主权项】：
利用双转基因和Flp‑Frt技术，在CRE的翻译起始密码子前加入一个“STOP“原件，可以抑制下游CRE的表达。在“STOP“原件的上下游各加上一个Frt序列，利用Flp重组酶，可以特异的删除两个Frt序列间的“STOP“原件，这时其下游的Cre重组酶可以表达。我们在Cre和Flp的表达质粒前各加上组织特异性的启动子，只有在这两个启动子都表达的组织Cre才会表达，大大提高Cre表达的组织特异性。
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