[发明专利]一种神经坏死病毒的病毒类似物的制备方法有效
| 申请号： | 201010267008.6 | 申请日： | 2010-08-31 |
| 公开（公告）号： | CN101942496A | 公开（公告）日： | 2011-01-12 |
| 发明（设计）人： | 谢俊锋;赖宇雄;何建国 | 申请（专利权）人： | 中山大学 |
| 主分类号： | C12P21/00 | 分类号： | C12P21/00;C07K1/22;C07K1/14;C12R1/19 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 陈卫 |
| 地址： | 510275 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，涉及一种神经坏死病毒病毒类似物的制备方法，包括以下步骤：（1）在原核条件下，将已含有编码神经坏死病毒衣壳蛋白基因的 pQE30质粒载体的大肠杆菌，进行神经坏死病毒病毒类似物的表达；表达的条件为：将OD600=1.5的大肠杆菌菌液按照1%的质量分数接种到培养基中，于37℃，250rpm下培养至OD600为0.3-0.5时，加入异丙基-β-D-硫代半乳糖苷至异丙基-β-D-硫代半乳糖苷终浓度为900μM，转移至25-30℃，200rpm的转速下继续培养3-4小时完成表达；（2）表达结束后，破裂菌体、分离及纯化获得神经坏死病毒的病毒类似物。其中质粒所编码的基因还可以含有组氨酸标签的神经坏死病毒衣壳蛋白基因，其表达产物可以通过亲和层析纯化。本发明所提供的方法可以获得较大的病毒类似物表达量；层析纯化方式简便，需要仪器设备及试剂成本低。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 神经 坏死 病毒 类似物 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种神经坏死病毒的病毒类似物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：（1）在原核条件下，将已含有编码神经坏死病毒衣壳蛋白基因的 pQE30质粒载体的大肠杆菌，进行神经坏死病毒病毒类似物的表达；表达的条件为：将OD600=1.5的大肠杆菌菌液按照1%的质量分数接种到培养基中，于37 ℃，250 rpm下培养至OD600为0.3‑0.5时，加入异丙基‑β‑D‑硫代半乳糖苷至异丙基‑β‑D‑硫代半乳糖苷终浓度为900 μM，转移至25‑30 ℃，200 rpm的转速下继续培养3‑4小时完成表达；（2）表达结束后，破裂菌体、分离及纯化获得神经坏死病毒的病毒类似物。
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