[发明专利]小麦黄矮病毒的多重PCR检测方法无效
| 申请号： | 201010267645.3 | 申请日： | 2010-08-31 |
| 公开（公告）号： | CN101921876A | 公开（公告）日： | 2010-12-22 |
| 发明（设计）人： | 吴云锋;杨洋 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京亿腾知识产权代理事务所 11309 | 代理人： | 陈惠莲 |
| 地址： | 712100 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明涉及小麦黄矮病毒的多重PCR检测方法，该方法包括小麦病毒总RNA的提取、逆转录反应制备cDNA模板，多重PCR反应，电泳检测，确定病毒种类，其中逆转录反应制备cDNA模板应用引物SEQ ID NO.2、SEQ IDNO.4和SEQ ID NO.6，多重PCR反应中应用引物SEQ ID NO.1-6。应用本发明的多重PCR检测小麦黄矮病的方法对田间复合侵染的小麦材料检测具有快速、省时、节约成本等优势。 | ||
| 搜索关键词： | 小麦 病毒 多重 pcr 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种利用多重PCR反应同时检测小麦黄矮病种群中PAV、GPV、GAV三种病毒的方法，该方法包括小麦病毒总RNA的提取、逆转录反应制备cDNA模板，多重PCR反应，电泳检测，确定病毒种类，其特征在于逆转录反应制备cDNA模板应用引物SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.6，多重PCR反应中应用引物SEQ ID NO.1 6，多重PCR反应的反应体系中，缓冲液浓度为0.4× 0.9×；dNTPs浓度为0.1 0.5mM；Mg2+浓度为1.0 3.5mM；退火温度为51 55℃；循环次数为20 45次；延伸时间为30 55s。
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