[发明专利]含基底膜的组织工程皮肤及其构建方法

摘要

本发明涉及组织工程和医学创面修复技术领域。目前以聚乳酸、聚羟基乙酸、胶原、透明质酸等材料作为真皮支架构建的活性皮肤替代物，一方面基质材料提取困难，制作工艺复杂，费用昂贵，难以在临床广泛推广应用，另一方面其不具备皮肤的基底膜结构，导致愈合皮肤不耐压和耐磨，表皮粘附不牢，容易脱落破损或形成水疱，且影响正常表皮结构、形态的发育。而异体脱细胞真皮取自尸体皮，来源有限，价格昂贵，限制了临床应用。本发明目的在于提供以一种以表面修饰改性的羊膜为基底膜，血浆为基质的皮肤替代物，其材料来源广泛、成本低廉、制备方法简单，经动物实验证明可在体内移植中保持完整的基底膜和半桥粒，加速并促进表皮结构形态的形成。

主权项

一种含基底膜的组织工程皮肤的构建方法，其特征在于该方法包括如下步骤：A)分离、培养角朊细胞、成纤维细胞；B)表面修饰改性羊膜：去除绒毛膜后的羊膜，经生理盐水反复浸泡、清洗后，于0.02％的EDTA溶液37℃消化2小时，超声振荡洗涤彻底除去残留的细胞碎片及绒毛膜组织，置于含1000U/ml庆大霉素、2.5g/ml两性霉素B的生理盐水中浸泡20至50分钟；C)构建组织工程皮肤；将B)步骤制备的羊膜与含成纤维细胞的血浆基质复合，再将角朊细胞以1‑5×105个/cm2的密度接种于羊膜表皮面，体外培养2‑3周。