[发明专利]柑桔碎叶病毒巢式RT-PCR检测方法及试剂盒无效
| 申请号： | 201010281556.4 | 申请日： | 2010-09-15 |
| 公开（公告）号： | CN101914633A | 公开（公告）日： | 2010-12-15 |
| 发明（设计）人： | 宋震;周常勇;李中安;刘科宏;杨方云;唐科志 | 申请（专利权）人： | 西南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 重庆市前沿专利事务所 50211 | 代理人： | 郭云 |
| 地址： | 400715*** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种检测柑桔碎叶病毒的巢式RT-PCR检测方法和试剂盒，属于生物技术领域。本方法通过提取核酸，应用柑桔碎叶病毒特异性上游外部引物、下游外部引物对待测样品进行第一轮RT-PCR扩增，再以柑桔碎叶病毒特异性上游内部引物、下游内部引物进行第二轮PCR扩增，最后电泳判断检测样品中是否存在柑桔碎叶病毒：电泳图谱中如出现256bp特征性条带，表明该样品中存在柑桔碎叶病毒，如果没有出现256bp特征性条带，表明该样品中不存在柑桔碎叶病毒。本发明还相应地建立了检测试剂盒，可特异、灵敏、高效地检测柑桔碎叶病毒，适用于田间样品检测、CTLV流行监控、脱毒苗木鉴定等多种用途。 | ||
| 搜索关键词： | 柑桔 病毒 rt pcr 检测 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种柑桔碎叶病毒巢式RT PCR检测方法，其特征在于：以柑桔碎叶病毒特异性上游外部引物、下游外部引物进行对待测样品第一轮RT PCR扩增，再以柑桔碎叶病毒特异性上游内部引物、下游内部引物进行第二轮PCR扩增，最后电泳鉴定；所述柑桔碎叶病毒的特异性引物为：上游外部引物：5’ CCCTCTCAGCTAGAATTGAA 3’下游外部引物：5’ AGAGTGGACAAACTCTA 3’上游内部引物：5’ GCTGATTTGGCTCGTGAATT 3’下游内部引物：5’ CTCCTAACCCTCCAGTTCCA 3’。
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