[发明专利]木芙蓉总黄酮中黄酮类化合物的检测方法

摘要

本发明公开的木芙蓉总黄酮中黄酮类化合物的检测方法，采用高效液相色谱仪、紫外检测器；按照中国药典2005版一部附录VI D高效液相色谱法测定；用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂：XBridge Shield RP18，4.6mm×250mm，5μm；特定的流动相；检测波长370nm或254nm；进样量20μL，理论塔板数按槲皮苷计算应不低于3000；按照制得的供试品溶液、对照品溶液在色谱检测条件下注入高效液相色谱仪进行检测。本发明的方法，根据槲皮苷的峰面积可以计算槲皮苷在总黄酮中所占的含量，根据供试品溶液的各个峰的出峰时间定性检测出芦丁与金丝桃苷。

主权项

一种木芙蓉总黄酮中黄酮类化合物的检测方法，其特征在于，具体按照以下步骤进行：步骤1，供试品溶液的制备：称取木芙蓉总黄酮0.5g，精密称定后加入蒸馏水适量，超声溶解，功率为200w，频率为40kHz，时间为10min；然后用水稀释至50ml，加入沸点60℃‑90℃石油醚萃取三次，每次50ml，石油醚液弃去，水液中再加入乙酸乙酯萃取三次，每次50ml，合并乙酸乙酯液并减压蒸干，残渣加甲醇溶解，定容至50ml，过0.45μm微孔滤膜，即得供试品溶液；对照品溶液的制备：精密称取芦丁、金丝桃苷、槲皮苷对照品适量，加甲醇制成每1mL分别含40.0μg、32.2μg、28.0μg的混合溶液，即得；采用的检测仪器：高效液相色谱仪、紫外检测器；采用的色谱检测条件：按照中国药典2005版一部附录VI D高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂：XBridge Shield RP18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相梯度为：在0‑10分钟，流速1.0ml/min，水与乙腈体积比为85∶15，在10‑15分钟，流速1.0ml/min，水与乙腈体积比为82∶18，在15‑20分钟，流速1.0ml/min，水与乙腈体积比为81∶19，在20‑25分钟，流速1.0ml/min，水与乙腈体积比为80∶20，在25‑28分钟，流速1.0ml/min，水与乙腈体积比为79∶21，在28‑31分钟，流速1.0ml/min，水与乙腈体积比为78∶22，在31‑33分钟，流速1.0ml/min，水与乙腈体积比为77∶23，在33‑36分钟，流速1.0ml/min，水与乙腈体积比为76∶24，在36‑38分钟，流速1.0ml/min，水与乙腈体积比为75∶25，在38‑45分钟，流速1.0ml/min，水与乙腈体积比为68∶32，在45分钟后，流速1.0ml/min，水与乙腈体积比为65∶35；检测波长370nm或254nm；进样量20μL，理论塔板数按槲皮苷计算应不低于3000；步骤2，按照步骤1制得的供试品溶液、对照品溶液在步骤1的色谱检测条件下注入高效液相色谱仪进行检测，根据槲皮苷的峰面积计算槲皮苷在总黄酮中所占的含量，根据供试品溶液的各个峰的出峰时间定性检测出芦丁与金丝桃苷。