[发明专利]一种从甲醛固定组织或甲醛固定石蜡包埋组织中提取总蛋白质的方法无效
申请号: | 201010286673.X | 申请日: | 2010-09-19 |
公开(公告)号: | CN101985461A | 公开(公告)日: | 2011-03-16 |
发明(设计)人: | 荀恒杰;李瑞峰 | 申请(专利权)人: | 生工生物工程(上海)有限公司 |
主分类号: | C07K1/30 | 分类号: | C07K1/30;C07K1/14 |
代理公司: | 上海脱颖律师事务所 31259 | 代理人: | 李强 |
地址: | 201611 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供了一种从甲醛固定组织或甲醛固定石蜡包埋组织中提取总蛋白质的方法,主要包括以下几个步骤:采用快速石蜡脱腊试剂将石蜡包埋组织中的石蜡彻底去除干净,再在双蒸水洗涤过的组织薄片中加入蛋白质提取试剂,经过两种不同温度的温育过程,将被甲醛交链的几乎全部蛋白质或多肽解链并完全释放出来,再经过快速蛋白质沉淀试剂,将释放的全部蛋白质或多肽完全沉淀出来。本发明的方法制备的组织全蛋白质提取液可以用于生物技术实验分析,为病理组织切片下游的Western blot,ELISA等免役实验,MS(质谱分析)和以疾病蛋白质组学的临床诊断提供了一种快速,安全,方便的途径。 | ||
搜索关键词: | 一种 甲醛 固定 组织 石蜡 包埋 提取 蛋白质 方法 | ||
【主权项】:
一种从甲醛固定组织或甲醛固定石蜡包埋组织中提取总蛋白质的方法,包括以下步骤:1)将甲醛固定的组织用不含有去污剂的蛋白质抽提试剂在两种不同的温度条件下温育以释放被交链的蛋白质;或者,将甲醛固定石蜡包埋的组织先用脱蜡试剂去蜡后,再用不含有去污剂的蛋白质抽提试剂在两种不同的温度条件下温育以释放被交链的蛋白质;2)离心并分离上清,上清加入蛋白质沉淀试剂后分离并洗涤沉淀,再将沉淀采用合适的溶解试剂溶解获得甲醛固定的组织或甲醛固定石蜡包埋的组织的总蛋白质提取液。
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