[发明专利]一种坏死梭杆菌的基因检测分型方法及试剂盒无效
申请号: | 201010289795.4 | 申请日: | 2010-09-25 |
公开(公告)号: | CN101956010A | 公开(公告)日: | 2011-01-26 |
发明(设计)人: | 陈立志;姚志利;王克坚;刘晓颖;冯二凯 | 申请(专利权)人: | 陈立志 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04 |
代理公司: | 吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 22100 | 代理人: | 陈宏伟 |
地址: | 132109 吉*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | 本发明公开一种致病性坏死梭杆菌的基因检测分型方法。根据坏死梭杆菌白细胞毒素启动子区序列设计3条引物,建立了聚合酶链式反应(PCR)检测方法,制成的试剂盒具有检测速度快,特异性好,灵敏度高,使用步骤简单,可重复性高,可以快速的对坏死梭杆菌进行检测分型。 | ||
搜索关键词: | 一种 坏死 杆菌 基因 检测 方法 试剂盒 | ||
【主权项】:
一种坏死梭杆菌快速检测分型的方法,根据坏死梭杆菌白细胞毒素启动子区序列设计3条特异性引物,两个亚种FNN和FNF分别扩增出1076 bp和809 bp的特异性片段,其中P1和P2分别位于坏死梭杆菌FNN亚种和FNF亚种白细胞毒素启动子区,P3为下游公共引物;引物如下:P1:5‑GCTCTCCTGCTTGTTTATTTC‑3P2:5‑GATCTTTGTTGGAAGCGAGT‑3P3:5‑GCACGACAAACCAAATAGC‑3具体步骤如下:1)采集并初步处理待检样品;2)从样品中抽提DNA;3)使用上述特异性引物进行PCR扩增;4)对步骤(3)中的PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,分离目的条带;5)对电泳结果进行分析,确定样品中是否有坏死梭杆菌以及是坏死梭杆菌的哪个亚种感染。
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