[发明专利]猪蓝耳病病毒与疫苗及二者的生产方法

摘要

本发明公开了一种大规模生产猪蓝耳病病毒的方法，利用生物反应器，以细胞微载体悬浮培养系统生产猪蓝耳病病毒，将制备病毒用宿主细胞接种到含有培养液与微载体的载体罐，并将上述细胞与微载体混合均匀，使细胞贴附在微载体上；在适当培养环境下，提供上述细胞足够的养分和适宜的气体环境，使细胞在上述微载体上生长至接种浓度的10～20倍；换用细胞维持培养液，将蓝耳病病毒制成病毒悬液，使其吸附到上述细胞上；在适当培养环境下培养病毒；连续培养2～3日后，收获病毒液；经检验合格后，将收获的病毒液于-20℃冻融两次，灭活纯化制备蓝耳病灭活疫苗或加入冻干保护剂进行冻干制备蓝耳病活疫苗。该方法生产规模大、单批次产量高、生产成本相对较低。

主权项

一种猪蓝耳病病毒的大规模生产方法，其特征在于，包括如下步骤：1)微载体生物反应器中，加入1.5×107～4.5×107cells/g微载体的传代细胞及细胞生长液，启动细胞吸附程序，使微载体与传代细胞充分结合后，启动细胞培养程序，培养传代细胞；2)上述传代细胞培养至6.0×109cells/L～2.6×1010cells/L时换用细胞维持液，按照感染复数为M.O.I.＝0.0001～1.5接种猪蓝耳病病毒，启动病毒吸附程序，使病毒与微载体上的细胞吸附完全后，换用病毒培养程序，扩增猪蓝耳病病毒；3)在生物反应器中收获猪蓝耳病病毒液。