[发明专利]一种乳酸菌细胞壁肽聚糖微胶囊的制备方法

摘要

一种乳酸菌细胞壁肽聚糖微胶囊的制备方法，它涉及一种肽聚糖微胶囊的制备方法。它解决了现有细胞壁肽聚糖基本采用注射方式给药，存在口服生物利用度低及过高剂量会引起不良反应的问题。方法：L-乳酸菌菌体悬浮于三氯乙酸溶液中，离心洗涤沉淀后加到胰蛋白酶磷酸缓冲液中，制备去蛋白的细胞壁沉淀，洗涤后加氯仿甲醇混合溶液，制备肽聚糖提取物粉末，与蒸馏水混合后超声处理得悬浊液，壳聚糖和醋酸溶液混合后加悬浊液，再滴加到液体石蜡中，乳化后加入戊二醛溶液得反应液，离心后清洗沉淀即完成。本发明所得产品具有降低肽聚糖在胃肠道内的破坏程度的作用，增强其口服生物利用度，且可通过缓释作用避免肽聚糖浓度过高引起的中毒甚至致死反应。

主权项

一种乳酸菌细胞壁肽聚糖微胶囊的制备方法，其特征在于乳酸菌细胞壁肽聚糖微胶囊的制备方法按以下步骤实现：一、将L‑乳酸菌接种到MRS培养基中，在37℃下富集培养48h，得菌种培养液，经离心、洗涤后收集L‑乳酸菌菌体；二、取20g L‑乳酸菌菌体悬浮于100mL浓度为100g/L的三氯乙酸溶液中，在75℃水浴中处理25min，冷却至室温后离心并收集沉淀，然后用蒸馏水洗涤沉淀至pH值呈中性；三、按固液比1∶5将沉淀加入到胰蛋白酶磷酸缓冲液中，在37℃、转速120r/min的条件下震荡12h，以1500r/min的转速离心5min弃取沉淀，然后取上清液以8000r/min的转速离心15min，得去蛋白的细胞壁沉淀，用蒸馏水洗涤3次后加入氯仿甲醇混合溶液浸泡去蛋白的细胞壁沉淀6h，再以8000r/min的转速离心15min，所得沉淀用无水乙醇洗涤脱水，自然干燥后放入研钵中研磨成粉末，得肽聚糖提取物粉末；四、将50mg肽聚糖提取物粉末和5ml蒸馏水混合后超声处理10min，得悬浊液；五、将50mg壳聚糖和5ml质量浓度为2％的醋酸溶液混合，然后加入悬浊液，搅拌后静止消泡，再滴加到60ml液体石蜡中并磁力搅拌，乳化1h后加入0.15ml质量浓度为50％的戊二醛溶液，交联3h，得反应液；六、反应液以4000r/min的转速离心10min，弃去上清得黄色沉淀，然后依次用石油醚清洗3次、异丙醇清洗2次、蒸馏水清洗1次，即完成乳酸菌细胞壁肽聚糖微胶囊的制备。