[发明专利]美洲狼尾草快速繁殖方法及美洲狼尾草快速脱毒繁殖方法

摘要

本发明涉及一种美洲狼尾草快速繁殖方法及美洲狼尾草快速脱毒繁殖方法，包括外植体的取材及灭菌、接种进行一次成苗培养、生根培养、炼苗移栽、脱毒检测等步骤。建立的美洲狼尾草脱毒组培快繁技术体系，脱毒效果好，其生根率达100％，移栽成活率达95％以上，适合工厂化育苗，可商品化生产，适用于美洲狼尾草种苗工厂化快速繁殖，从而大大节省了传统方法的繁种用地。为大量工厂化育苗，提供了有力的保障。

主权项

一种美洲狼尾草快速繁殖方法，包括外植体的取材及灭菌、接种进行一次成苗培养、生根培养、炼苗移栽步骤，其特征在于：(1)外植体的取材及灭菌步骤：取美洲狼尾草茎尖顶部或幼嫩心叶，作为脱毒组培用外植体；用质量浓度为75％的乙醇溶液浸泡30s后再用另一份质量浓度为75％的乙醇溶液浸泡60s，然后用无菌水冲洗3～5次，再用质量浓度为0.1％的氯化汞溶液消毒5～10min，然后用无菌水冲洗3～5次；(2)诱导培养步骤：在无菌条件下，将消毒好的外植体切成1个顶芽或腋芽、且长度为1～2cm的茎段，接种于诱导培养基上，置于20‑25℃的黑暗条件下培养5天，然后转入光照条件培养，温度为20～23℃、湿度为60％～65％、光照强度为70～80μmol cm‑2s‑1、每天光照12～14h的条件下培养至无菌芽生长长度为1～1.5cm；(3)继代培养步骤：将增生的无菌芽一起转接于继代培养基中，在温度为25～28℃、湿度为70％～80％、光照强度为40～60μmol cm‑2s‑1、每天光照16～18h的条件下培养至无菌芽生长长度为2～5cm即为微枝苗；(4)壮苗培养步骤：将每个微枝苗接种于壮苗培养基中，在温度为25～28℃、湿度为70％～80％、光照强度为40～60μmol cm‑2s‑1、每天光照16～18h的条件下培养至微枝生长长度为6～8cm；(5)生根培养步骤：将增壮后的微枝切割成带有1个顶芽或1～2个腋芽、且长度为1～2cm的茎段，然后逐段接种于生根培养基进行生根培养；(6)炼苗移栽步骤：将生根培养30天且根系达2‑3cm的完整小苗，进行炼苗移栽。