[发明专利]一种荧光探针和用该探针快速检测金黄色葡萄球菌的方法

摘要

本发明公开了一种荧光探针，用下述方法制备：首先将在羧甲基壳聚糖模板中合成的荧光量子点纯化，通过碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺的耦合作用与人IgG抗体连接；然后使用葡聚糖凝胶柱分离纯化获得免疫修饰的羧甲基壳聚糖量子点荧光探针。本发明还公开了用上述荧光探针检测金黄色葡萄球菌的方法，具体为：将该荧光探针与待测菌共培养30min，通过多次离心洗涤除去非特异性吸附的荧光探针，最后将荧光探针标识的细菌悬浮于磷酸缓冲液中，采用荧光光谱和紫外可见吸收光谱测定菌悬液的荧光和吸收强度，根据荧光强度与菌悬液浓度的线性关系实现对金黄色葡萄球菌的定量测定。该方法清洁、简单、快速，适合应用于紧急情况下的快速检测。

主权项

一种荧光探针，其特征在于，采用如下方法制备：(1)制备以羧甲基壳聚糖为模板的CMCS/QDs量子点水溶液，将该量子点水溶液置于透过分子量为10,000道尔顿的透析袋中对蒸馏水透析3天；(2)碳二亚胺和N‑羟基琥珀酰亚胺分别溶解在蒸馏水中配成500mM～2μM的EDC溶液和500mM～2μM的NHS溶液，免疫球蛋白人IgG溶解在蒸馏水中配成0.5～5mg/ml的人IgG抗体溶液；(3)取纯化的CMCS/QDs量子点溶液3ml加入0.45ml的EDC溶液和0.12ml的NHS溶液的混合溶液中室温活化3～6h，向混合溶液中加入0.1ml人IgG抗体溶液，室温避光反应8～12h；(4)将反应后的产物在葡聚糖凝胶柱上分离，用蒸馏水透析3～5天，在小于40℃的温度下浓缩，即得到CMCS‑QDs‑IgG荧光探针。