[发明专利]分析蛋白的抗原表位的方法无效
| 申请号： | 201010526018.7 | 申请日： | 2010-10-25 |
| 公开（公告）号： | CN102021242A | 公开（公告）日： | 2011-04-20 |
| 发明（设计）人： | 张林琦;林章凛;史宣玲;刘中华;左腾;徐望晖 | 申请（专利权）人： | 清华大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/79;C12N15/70;G01N33/569 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;任凤华 |
| 地址： | 100084 北京市海淀*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种分析蛋白的抗原表位的方法。本发明的方法包括如下步骤：(1)构建目的蛋白的DNA文库；蛋白的编码基因的DNA片段插入T载体；T载体含酵母a凝集素Aga2p的编码基因，DNA片段编码的肽段与酵母a凝集素Aga2p的C端融合；(2)将DNA文库展示在酵母表面，得到酵母展示文库；(3)分选出与目的蛋白的抗体结合的酵母；(4)提取质粒测序，分析蛋白的抗原表位。本发明具如下优点：(1)酵母细胞对蛋白的修饰途径多，可方便地展示大分子量和复杂的蛋白，更好的模拟空间构象；(2)酵母可采用FACS逐个筛选，提高准确性与筛选通量；(3)酵母可独立完成自身的生长复制过程，操作简便，干扰因素少；(4)酵母不易被空气传播，不易交叉感染。 | ||
| 搜索关键词： | 分析 蛋白 抗原 方法 | ||
【主权项】：
分析蛋白的抗原表位的方法，包括如下步骤：(1)构建目的蛋白的DNA文库；所述DNA文库中，所述目的蛋白的编码基因的DNA片段插入T载体；所述T载体含有酵母a凝集素Aga2p的编码基因，且所述DNA片段编码的肽片段的N端与所述酵母a凝集素Aga2p的C端融合；(2)将所述DNA文库展示在酵母表面，得到酵母展示文库；(3)将目的蛋白的抗体与酵母展示文库混合，分选出与抗体结合的酵母；(4)将筛选出的酵母提取质粒进行测序，根据插入所述T载体的DNA片段的核苷酸序列分析蛋白的抗原表位。
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