[发明专利]艾迪注射制剂的检测方法

摘要

本发明提供了艾迪注射制剂的检测方法，所述检测方法为性状、鉴别、检查以及含量测定项目；其中鉴别为α-萘酚显色反应、以人参皂苷Re、Rg1、Rb以及黄芪甲苷为对照对制剂中人参和黄芪的薄层色谱鉴别；含量测定是对制剂中人参所含人参皂苷Re、斑蝥所含斑蝥素的含量测定；检查为对pH值、重金属、热原、蛋白质、鞣质等安全性指标的检查；与现有技术相比，本发明质量控制方法可有效地控制产品质量，从而确保其临床疗效。

主权项

一种艾迪注射制剂的检测方法，其特征在于：所述检测方法为：性状：对于冻干粉针剂，产品为浅棕色的疏松块状物；对于输液剂，产品为浅棕色的澄明液体；对于水针剂，产品为浅棕色的澄明液体；鉴别：(1)分别取冻干粉针加注射用水使溶解、或取输液浓缩、或直接取水针剂，加乙醇搅匀，滤过，沉淀物用乙醇洗涤1‑5次，将沉淀物用蒸馏水溶解，取0.5‑3ml置试管中，微热后加入2‑10％α‑萘酚乙醇溶液，摇匀，再沿管壁缓缓加入浓硫酸，在二液面接界处显紫红色环；(2)分别取冻干粉针加注射用水使溶解、或取输液浓缩、或直接取水针剂，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇提取1‑4次，合并提取液，置水浴上蒸干，残渣用蒸馏水溶解，加入预先制备好的DA‑201树脂柱上，用水洗涤，再用20‑80％甲醇液洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取人参皂苷Re、Rg1、Rb及黄芪甲苷对照品，加甲醇溶解，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇∶水＝1‑10∶2‑15∶1‑10∶1‑10，10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热数分钟，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；检查：pH值：应为3.0‑6.5；重金属：取冻干粉针20‑40mg加注射用水2ml使溶解、或取输液8‑20ml浓缩至2ml、或取水针剂2ml；置坩埚中，水浴上蒸干，照中国药典重金属检查法检查，含重金属不得过百万分之五；热原：取冻干粉针300‑600mg加注射用水30ml使溶解、或取输液100‑300ml浓缩至30ml、或取水针剂30ml；用氯化钠注射液或5～10％葡萄糖注射液稀释至100ml，按家兔体重1kg注射10ml的剂量，照中国药典热原检查法检查，应符合规定；其他：应符合中国药典注射剂项下有关的各项规定；含量测定：(1)人参皂苷Re对照品溶液的制备：精密称取人参皂苷Re对照品，加甲醇溶解，摇匀，即得；标准曲线的制备：精密量取对照品溶液0、20、40、60、80、100μl，分别置10ml具塞试管中，置水浴上挥去溶剂，立即取出，放冷，加2‑10％香草醛冰醋酸溶液、高氯酸，摇匀，置水浴中加热，取出，用水冷却，加冰醋酸，摇匀，照中国药典分光光度法，测定吸收度，以吸收度为纵坐标、浓度为横坐标，绘制标准曲线；供试品溶液的制备：分别取冻干粉针加注射用水使溶解、或取输液浓缩、或直接取水针剂，置分液漏斗中，用氯仿提取1‑5次，合并氯仿提取液，用蒸馏水洗涤1‑4次，弃去氯仿液，洗液与上述水层合并，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇提取1‑5次，合并正丁醇提取液，加入无水硫酸钠，搅拌，放至澄清，将正丁醇液移至蒸发皿中，用少量正丁醇洗涤无水硫酸钠，洗液并入蒸发皿中，蒸干，用少量蒸馏水溶解残渣，加到大孔吸附树脂DA‑201柱上，待液面接近棉花层后，用蒸馏水洗脱，弃去洗液，用40‑90％乙醇洗脱，收集洗脱液于蒸发皿中，置水浴上蒸干，用甲醇溶解残渣，移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；测定法：精密量取供试品溶液100μl，照标准曲线的制备项下的方法，自“置10ml具塞试管中”起依法测定吸收度；从标准曲线上读出供试品溶液中人参皂苷Re的重量μg，计算；该注射制剂中，冻干粉针剂中含人参以人参皂苷Re计，不得少于1％；输液剂中含人参以人参皂苷Re计，不得少于0.01mg/ml；水针剂中含人参以人参皂苷Re计，不得少于0.1mg/ml；(2)斑蝥素照中国药典气相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验：玻璃色谱柱1‑2m×3mm id，以OV‑17为固定液，OV‑17由50％甲基、50％苯基聚硅氧烷组成，涂渍量为0.5‑3％，担体Shimalite W AW‑DMCS 60‑120目；柱温为160±10℃；理论板数按斑蝥素峰计算，应不低于1500；对照品溶液的制备：取斑蝥素对照品，精密称定，加氯仿溶解，摇匀，作为对照品溶液；供试品溶液的制备：分别取冻干粉针加注射用水使溶解、或取输液浓缩、或直接取水针剂，加入1‑3mol/L硫酸溶液，再精密加入氯仿，振摇提取，静置分层，离心，取下层液即得；测定法：分别精密量取对照品溶液和供试品溶液，注入气相色谱仪，计算；该注射制剂中，冻干粉针剂中含斑蝥素为0.0005％‑0.05％；输液剂中含斑蝥素为0.00001‑0.001mg/ml；水针剂中含斑蝥素为0.0001‑0.005mg/ml。