[发明专利]一种以细菌纤维素小球/膜块为载体制备固定化酶的方法有效
| 申请号： | 201010531814.X | 申请日： | 2010-11-04 |
| 公开（公告）号： | CN101967471A | 公开（公告）日： | 2011-02-09 |
| 发明（设计）人： | 洪枫;杨雪霞;杨光;曹张军 | 申请（专利权）人： | 东华大学 |
| 主分类号： | C12N11/12 | 分类号： | C12N11/12;C12P19/04;C12R1/02;C12R1/01;C12R1/41;C12R1/38 |
| 代理公司： | 上海泰能知识产权代理事务所 31233 | 代理人： | 黄志达;谢文凯 |
| 地址： | 201620 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种以细菌纤维素小球/膜块为载体制备固定化酶的方法，包括：发酵制备细菌纤维素小球或细菌纤维素膜；然后用0.1％的NaOH在80～90℃水浴中处理30～120min，去离子水漂洗，收集，用0.1％的醋酸中和残留的碱液，静置，去离子水漂洗，将小球或膜块取出，吸干表面水分，冷冻，然后冷冻干燥后备用；最后采用物理吸附法或吸附～交联法制备固定化酶。本发明的细菌纤维素小球/膜块能高效吸附生物酶，最大限度地保持酶的活性，且安全环保，方法简单，易于操作，可控性强。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 细菌 纤维素 小球 载体 制备 固定 方法 | ||
【主权项】：
一种以球形细菌纤维素为载体制备固定化酶的方法，包括：(1)细菌纤维素小球的制备将活化的斜面菌种接入pH4.8～5.2的种子培养基，在25～30℃、100～200rpm条件下培养12～16h制得液体种子，以体积百分比为4～10％接种量将液体种子转接至pH4.8～5.2的发酵培养基中，每500mL锥形瓶中含有200～300mL发酵培养液，25～30℃，80～200rpm条件下培养48～96h，倾滤，得细菌纤维素小球；(2)细菌纤维素小球的处理将发酵收集得到的细菌纤维素小球用质量分数为0.1％的NaOH在80～90℃水浴中处理30～120min，用去离子水漂洗3～5次，收集，用体积分数为0.1％的醋酸中和小球内残留的碱液，静置12～24h，用去离子水漂洗2～3次，在水中保持其球状形态，将小球取出，吸干表面水分，在液氮中速冻或在低温冰箱里冷冻，然后在冷冻干燥机中干燥后获得白色纤维素小球；(3)细菌纤维素小球固定化酶的制备以细菌纤维素小球为载体采用物理吸附法或吸附～交联法制备固定化酶。
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