[发明专利]一种基于PCR-ELISA的结核分枝杆菌耐药基因检测方法无效
| 申请号： | 201010541361.9 | 申请日： | 2010-11-12 |
| 公开（公告）号： | CN102465177A | 公开（公告）日： | 2012-05-23 |
| 发明（设计）人： | 张舒林;唐神结;孙战强;张颖;王洪海;郭晓奎 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学医学院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 上海翼胜专利商标事务所(普通合伙) 31218 | 代理人： | 翟羽 |
| 地址： | 200025 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供一种基于PCR-ELISA的结核分枝杆菌耐药基因检测方法，包括以下步骤：（1）针对rpoB基因突变位点设计11个探针，并将之点样于96微孔板；（2）每一个检测样本的DNA均分3个反应管同时扩增，每管加入rpoB-F和rpoB-R两种引物，每对引物中的下游引物5’端均用地高辛标记，经PCR扩增出大量含有地高辛标记的结核分枝杆菌相应的基因片段产物；（3）将扩增产物与探针进行杂交，杂交后带有地高辛标记的目标基因与探针结合在一起，洗去未结合的片段，通过ELISA反应，测量OD值得出结果。本方法提供了一次杂交实验即可快速获得结核分枝杆菌对多个临床分离株的药物耐受信息，使得结核分枝杆菌分离株耐药性检测缩短到6－8h，充分显示了该方法的优越性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 pcr elisa 结核 分枝杆菌 耐药 基因 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种基于PCR‑ELISA的结核分枝杆菌耐药基因检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）针对rpoB基因突变位点设计11个探针，且将所述探针点样于96微孔板；（2）每一个检测样本的DNA分3个反应管，每管中都加入rpoB‑F和rpoB‑R两种引物，每对引物中的下游引物5’端均带有地高辛标记，经PCR扩增出大量含有所述地高辛标记的结核分枝杆菌相应的基因片段产物；（3）将所述扩增产物与所述探针进行特异性杂交，杂交后带有所述地高辛标记的目标基因与所述探针结合在一起，洗去未结合的片段，通过ELISA反应，测量OD值得出结果。
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