[发明专利]一种Bt蛋白体外抗虫鉴定的方法有效
| 申请号： | 201010585252.7 | 申请日： | 2010-12-13 |
| 公开（公告）号： | CN102086452A | 公开（公告）日： | 2011-06-08 |
| 发明（设计）人： | 铁双贵;岳润清;卢彩霞;齐建双;王延召;朱卫红;柏松;孙静 | 申请（专利权）人： | 河南省农业科学院 |
| 主分类号： | C12N15/09 | 分类号： | C12N15/09;C12P21/02;A01K67/033;A23K1/16;C12R1/21 |
| 代理公司： | 郑州大通专利商标代理有限公司 41111 | 代理人： | 樊羿 |
| 地址： | 450002 河南*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种Bt蛋白体外抗虫鉴定的方法。该方法将Bt基因连接到原核表达载体pET-28B上，将含有Bt基因的原核表达载体转入大肠杆菌BL21中，进行诱导表达Bt蛋白，提取诱导表达出的Bt蛋白，将此Bt蛋白拌入玉米螟幼虫人工饲料中喂养玉米螟幼虫，数天后统计玉米螟幼虫的死亡率和生长状况。该方法操作简单，快速，不受时间和季节限制、经济成本低，能快速地进行Bt蛋白抗虫鉴定。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 bt 蛋白 体外 鉴定 方法 | ||
【主权项】：
一种Bt蛋白体外抗虫鉴定的方法，包括以下步骤：（1）将待鉴定的Bt基因克隆进原核表达载体PET‑28B中；（2）将含有Bt基因的原核表达载体PET‑28B转入大肠杆菌BL21中；（3）诱导培养含Bt基因的大肠杆菌BL21产生Bt蛋白；（4）收集分离上步所得菌体，加溶菌酶后破碎菌体，分离提取BT蛋白；（5）以玉米螟为受试昆虫，将上步提取的Bt蛋白掺入玉米螟饲料中，饲喂试验组玉米螟，同时分别以蒸馏水、含空原核表达载体的大肠杆菌BL21菌液掺入玉米螟饲料中饲喂对照组玉米螟，同样的条件下饲养8～10天后统计死亡率和虫体重量，进而确定Bt蛋白的杀虫效果。
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