[发明专利]一种表达β-半乳糖苷酶的重组菌株及其构建方法和应用

摘要

本发明公开了一种表达β-半乳糖苷酶的重组菌株及其构建方法和应用。克隆得到Thermus thermophilus HB27半乳糖苷酶基因bgal，并将其插入到真核表达载体pPIC9K上，转化毕赤酵母菌株GS 115内，可得到β-半乳糖苷酶表达量达到14000U/ml。β-半乳糖苷酶基因bgal表达的分子量为58Dk，最适温度为70℃，其最适温度下很稳定。在pH6.5时该乳糖酶水解活力最高，而且稳定性较好。高效表达的β-半乳糖苷酶可直接用于乳制品的巴氏消毒法，可以做到灭菌的同时降解乳糖，避免了灭菌后添加酶所造成的二次污染。在60度，30分钟，HB27半乳糖苷酶可以降解牛奶90％的乳糖。

主权项

一种表达β‑半乳糖苷酶的重组菌株，其特征在于该菌株为基因组DNA上整合了来源于嗜热栖热菌(Thermus thermophilus)HB27的β‑半乳糖苷酶基因bgal的毕赤酵母。