[发明专利]一种可用于外源基因表达的载体及细胞株筛选方法有效
| 申请号： | 201010603674.2 | 申请日： | 2010-12-24 |
| 公开（公告）号： | CN102559734A | 公开（公告）日： | 2012-07-11 |
| 发明（设计）人： | 谢良志;孙春昀;罗春霞;盖文琳 | 申请（专利权）人： | 神州细胞工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/79 | 分类号： | C12N15/79;C12N15/65;C12N15/113;C12N15/54;C12N15/52;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100176 北京市经*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种在哺乳动物细胞中高效表达的载体，该载体将目的基因表达和筛选基因潮霉素B磷酸转移酶表达紧密连接在一起，该载体采用弱化扩增基因DHFR的表达来提高MTX筛选效率，降低MTX使用浓度的技术。本发明提供了采用以上技术优化的表达载体转染细胞后，获得高水平表达克隆的筛选方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 基因 表达 载体 细胞株 筛选 方法 | ||
【主权项】：
一种获得目的蛋白稳定表达的真核细胞表达载体，该载体包含：a)一个包含强病毒启动子的目的蛋白表达盒，该表达盒放置于筛选标记的基因内部；b)一个包含弱病毒启动子的筛选标记表达盒，该筛选标记基因序列中加入了内含子元件，目的蛋白的表达盒被放置于该内含子元件中；c)一个包含弱真核细胞启动子的扩增标记的表达盒。
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