[发明专利]用FQ-PCR检测嗜水气单胞菌的方法

摘要

本发明提供的用FQ-PCR检测嗜水气单胞菌的方法，应用FQ-PCR方法和针对仅存于有毒力的嗜水气单胞菌中的因子的上下游引物对模板中是否存在有毒力的嗜水气单胞菌进行检测，所用上下游引物及TaqMan探针是针对溶血素基因（hlyA）或丝氨酸蛋白酶基因（ahpA）的。与现有技术相比，由于所针对的因子是有毒力的嗜水气单胞菌株所特有的，因此可准确地检定试样中是否存在有毒力的嗜水气单胞菌株，从而提高疾病预警的准确性。同时，通过所说方法一或方法二检测出模板中含有溶血素基因（hlyA）或丝氨酸蛋白酶基因（ahpA），则表明其含有一定致病性，而通过方法三检测出模板中含有溶血素基因（hlyA）和丝氨酸蛋白酶基因（ahpA），则表明其含有较高致病性。

主权项

一种用FQ‑PCR检测嗜水气单胞菌的方法，先制备嗜水气单胞菌模板DNA，再进行扩增反应，即将准备好的扩增反应液加入模板DNA中，然后在PCR仪上进行扩增反应并获得数据供计算机进行计算，最后判断结果，其特征是所说扩增反应液中包括针对仅存于有毒力的嗜水气单胞菌菌株中的因子的上、下游引物，其中上游引物的DNA序列为5’‑ACC GCA AGA TCA ACG ATA CCG AGT‑3’，下游引物的DNA序列为5’‑ATC CAG CGA GAT CCG CAC TAT CTT‑3’。