[发明专利]测定不对称二甲基精氨酸浓度的方法及诊断试剂盒有效
申请号: | 201010615214.1 | 申请日: | 2010-12-30 |
公开(公告)号: | CN102154444A | 公开(公告)日: | 2011-08-17 |
发明(设计)人: | 宋占科;刘希;刘瑶 | 申请(专利权)人: | 北京九强生物技术股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/527 | 分类号: | C12Q1/527;C12Q1/25;C12Q1/34;C12Q1/32 |
代理公司: | 北京戈程知识产权代理有限公司 11314 | 代理人: | 程伟 |
地址: | 100083 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及测定不对称二甲基精氨酸浓度的方法及诊断试剂盒。具体而言,本发明的方法和试剂盒采用二甲基精氨酸二甲氨基水解酶降解ADMA产生二甲胺和瓜氨酸,瓜氨酸和ATP、天冬氨酸在精氨琥珀酸合成酶作用下产生AMP,AMP在AMP脱氨酶作用下产生IMP和氨,氨和脱氨基辅酶在辅酶合成酶的作用下生成氧化型辅酶,通过检测辅酶浓度,进而计算出ADMA的浓度。本发明的方法和试剂盒测定结果准确,速度快,重复性好,抗干扰能力强,便于推广使用。 | ||
搜索关键词: | 测定 不对称 甲基 精氨酸 浓度 方法 诊断 试剂盒 | ||
【主权项】:
一种测定不对称二甲基精氨酸浓度的方法,其包括下述步骤:1)向样品中加入二甲基精氨酸二甲氨基水解酶,使不对称二甲基精氨酸和水反应产生二甲胺和瓜氨酸,2)向步骤1)的混合物中加入ATP、天冬氨酸和精氨琥珀酸合成酶,使瓜氨酸发生反应产生AMP,3)向步骤2)的混合物中加入AMP脱氨酶,使AMP和水反应产生IMP和氨,4)向步骤3)的混合物中加入ATP、NAD合成酶和脱氨基氧化型辅酶NAD,使氨发生反应生成氧化型辅酶,5)通过测定产生的氧化型辅酶NAD的浓度测得不对称二甲基精氨酸的浓度,可选地,上述二甲基精氨酸二甲氨基水解酶与ATP、天冬氨酸、精氨琥珀酸合成酶、AMP脱氨酶、NAD合成酶和脱氨基氧化型辅酶NAD分两批或三批加到样品中。
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