[发明专利]复杂核酸的扩增

摘要

描述了一种对待分析的复杂模板核酸进行定量和定性分析的方法。所述方法包括通过等温链置换反应使对照核酸与复杂模板核酸共同扩增。本发明的方法还包括测定扩增的对照核酸的量，作为测定所用复杂模板核酸的数量和/或质量的量度。本发明还涉及一种用于进行本发明方法的试剂盒。此外，还描述了本发明的方法或本发明的试剂盒在标准化全基因组、全转录物组和全亚硫酸氢盐组分析中的用途。

主权项

一种对样品中一种或多种待扩增的复杂模板核酸进行定量和定性分析的方法，所述方法包括以下步骤：a)提供反应混合物，其包含‑所述待扩增的模板核酸；‑指定量的至少一种对照核酸，其中所述对照核酸与所述模板核酸具有小于50％的序列相同性，并且其中所述对照核酸具有至少一个已知的序列片段；‑用于扩增所述模板核酸的引物；‑用于扩增所述对照核酸的引物；‑适于核酸扩增的酶和试剂；b)对所述模板核酸和所述对照核酸进行共同扩增，其中所述共同扩增等温进行，其中所述共同扩增包括链置换反应，并且其中所述模板和对照核酸通过所述扩增基本上完全扩增，以允许对照核酸和模板核酸竞争任意所述引物、酶和试剂；c)对所述扩增的对照核酸进行定量，以评估所述复杂模板核酸的起始量或质量，其中所述定量在步骤b)的所述共同扩增结束后进行，其中，通过使用与所述至少一个已知序列片段杂交的序列特异性引物进行扩增的方式对所述扩增的对照核酸进行定量；和d)基于步骤c)对再次扩增的对照核酸进行定量的结果，确定进行步骤b)的共同扩增之前存在的所述复杂模板核酸的数量或质量。