[发明专利]纯化蛋白复合物的方法有效
申请号: | 201080031703.0 | 申请日: | 2010-06-21 |
公开(公告)号: | CN102458460B | 公开(公告)日: | 2018-01-30 |
发明(设计)人: | 卡米洛·科拉科;科林·理查德·比格内尔 | 申请(专利权)人: | 免疫生物学有限公司 |
主分类号: | A61K39/00 | 分类号: | A61K39/00;A61K39/385;C07K1/00 |
代理公司: | 北京安信方达知识产权代理有限公司11262 | 代理人: | 申基成,郑霞 |
地址: | 英国*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 本发明提供了用于从源混合物纯化包括复合于肽或肽片段的应激蛋白的复合物的混合物的改良的方法,所述源混合物通常为细胞裂解物。本发明的方法提供了待利用基于离子交换色谱的方法纯化的蛋白复合物,其中使用了改良的缓冲液,产生比利用常规方法获得的蛋白复合物更具免疫原性的纯化的应激蛋白复合物。纯化的复合物可用来产生在被施用疫苗组合物的受治疗者中引起增强的免疫应答的改良的疫苗制备物。 | ||
搜索关键词: | 纯化 蛋白 复合物 方法 | ||
【主权项】:
一种用于纯化应激蛋白和多肽之间形成的复合物的方法,所述方法包括以下步骤:(i)提供源混合物,所述源混合物包括由与多肽复合的应激蛋白形成的至少一种靶应激蛋白复合物,(ii)确定待从所述源混合物纯化的所述至少一种靶应激蛋白复合物的等电点(pI);(iii)从包括所鉴定的应激蛋白复合物的所述源混合物制备澄清的细胞裂解物;(iv)使步骤(iii)的所述澄清的细胞裂解物经受利用离子交换的纯化,其中在离子交换过程中所述澄清的细胞裂解物被包括至少一种二价阳离子的第一缓冲液缓冲至所述靶应激蛋白复合物的pI的2个单位内的pH,并且其中使用提供盐梯度的第二缓冲液来洗脱靶应激蛋白复合物的混合物。
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