[发明专利]对双链DNA中的目标序列进行扩增的方法

摘要

本发明提供在PCR法中抑制非特异性扩增的方法。本发明为一种PCR法，其是利用正向引物和反向引物对模板双链DNA中的所需目标序列进行扩增的PCR法，其特征在于，在所述PCR溶液中含有寡核酸A和寡核酸B中的至少任一种，所述寡核酸A是结合在所述模板双链DNA中所述正向引物所结合的单链DNA上、其结合位置比所述正向引物更靠3′侧下游且为目标序列的外侧、不会成为利用DNA聚合酶的延伸反应的起点；所述寡核酸B是结合在所述模板双链DNA中所述反向引物所结合的单链DNA上、其结合位置比所述反向引物更靠3′侧下游且为目标序列的外侧、不会成为利用DNA聚合酶的延伸反应的起点。

主权项

一种对由第1单链DNA和第2单链DNA构成的双链DNA中的双链目标序列进行扩增的方法，其中，所述双链目标序列由单链目标序列和互补性单链目标序列构成，所述第1单链DNA由3’末端‑第1非扩增序列‑所述单链目标序列‑第2非扩增序列‑5’末端构成，所述第2单链DNA由5’末端‑第3非扩增序列‑所述互补性单链目标序列‑第4非扩增序列‑3’末端构成，所述互补性单链目标序列、第3非扩增序列和第4非扩增序列分别与所述单链目标序列、所述第1非扩增序列和第2非扩增序列互补，所述方法是将DNA聚合酶、脱氧核苷三磷酸、所述双链DNA、正向引物、反向引物和第1阻碍核酸混合，使用聚合酶链反应对所述双链目标序列进行扩增的工序A，其中，所述正向引物和所述反向引物均作为用于利用所述DNA聚合酶的延伸反应的起点发挥作用，所述正向引物与所述单链目标序列所含的3’末端侧的序列的部分互补，所述反向引物与所述互补性单链目标序列所含的3’末端侧部分的序列互补，所述第1阻碍核酸不会作为用于利用所述DNA聚合酶的延伸反应的起点发挥作用，所述第1阻碍核酸与所述第3非扩增序列的一部分互补。