[发明专利]一种Viili胞外多糖及其制备方法

摘要

本发明涉及一种Viili中胞外多糖及其制备方法，Viili胞外多糖的提取主要包括酶解、脱蛋白、乙醇沉淀等步骤；胞外多糖的分离纯化主要包括离子交换层析及凝胶过滤层析。本发明还公开了一种Viili中胞外多糖的组成，主要由鼠李糖、阿拉伯、木糖、苷露糖、葡萄糖、半乳糖组成，其摩尔比为：7.41∶15∶8.85∶1∶3.25∶1.25，该胞外多糖的单糖残基以吡喃环和呋喃环的形式存在。本发明Viili胞外多糖的制备方法及产品适于作为脂质体纳米材料及功能性食品中的功能因子，有利于某些特殊药物载体材料及新型功能食品开发。

主权项

一种Viili中胞外多糖的制备方法，其特征在于：方法步骤如下：(1)发酵：纯牛乳灭菌，按1％～3％接种量接种Viili，将接种后的牛乳置于25‑35℃培养箱中，培养15～17h后取出，置于4℃冰箱中4～8h，得到发酵乳；(2)等电点法除酪蛋白：用饱和NaOH溶液调发酵乳的pH至8.0，离心、取上清液，再用HCl调节上清液pH至4.6，再离心，再调上清液的pH至7.5；(3)酶解：在上述上清液中加入1/6总体积的胰酶液，胰酶液浓度为2‑5g/L，水浴下酶解2‑3h，3000r/min，离心15min，得到酶解液；(4)脱蛋白：以酶解液∶氯仿∶正丁醇＝30∶8∶1进行蛋白质沉淀1‑3h，离心，去除沉淀，得到的滤液中无游离蛋白；(5)乙醇沉淀：将步骤(4)所得滤液预冷，加入5～6倍体积的预冷无水乙醇，置于1‑5℃冰箱中沉淀40‑55h，本步骤中多糖呈絮状沉淀析出，取沉淀；(6)透析：将经过步骤(5)得到的沉淀用截留14kDa分子量的透析袋在超纯水中透析25‑30h，得沉淀物，在低于50℃下进行真空干燥，得到Viili胞外粗多糖。