[发明专利]一种快速检测淡水鱼中华支睾吸虫囊蚴的方法及其试剂盒无效
申请号: | 201110004772.9 | 申请日: | 2011-01-11 |
公开(公告)号: | CN102146446A | 公开(公告)日: | 2011-08-10 |
发明(设计)人: | 陈韶红;李树清;张永年;陈家旭;艾琳 | 申请(专利权)人: | 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 上海世贸专利代理有限责任公司 31128 | 代理人: | 严新德 |
地址: | 200025 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供了一种快速检测淡水鱼中华支睾吸虫囊蚴的方法,包括一个对离体的淡水鱼样品处理的步骤;一个提取样品DNA的步骤;一个对样品的DNA进行PCR扩增的步骤;一个对PCR扩增的产物进行电泳观察的步骤;在一个对淡水鱼样品处理的步骤中,将待检测的样品加入缓冲液匀浆用玻璃珠打碎,然后吸取匀浆液滴在FTA卡上;在一个提取样品DNA的步骤中,将FTA卡自然干燥,然后将FTA卡用PTA卡洗液洗涤。本发明还提供了一种快速检测淡水鱼中华支睾吸虫囊蚴的试剂盒,用本发明的方法能检测到每g淡水鱼中1个吸虫囊蚴,定量PCR技术能区分淡水鱼中3种不同的囊蚴,具有简便、快速且敏感性高的优点,适宜食品安全、海关防疫检验。 | ||
搜索关键词: | 一种 快速 检测 淡水鱼 中华 吸虫 方法 及其 试剂盒 | ||
【主权项】:
一种快速检测淡水鱼中华支睾吸虫囊蚴的方法,包括一个对离体的淡水鱼样品处理的步骤、一个提取样品DNA的步骤、一个对样品的DNA进行PCR扩增的步骤和一个对PCR扩增的产物进行电泳观察的步骤;其特征在于:在所述的对离体的淡水鱼样品处理的步骤中,将待检测的样品加入缓冲液用玻璃株匀浆打碎,然后吸取匀浆液滴在FTA卡上,在所述的提取样品DNA的步骤中,将FTA卡自然干燥,然后将FTA卡用FTA卡洗液洗涤,在所述的对样品的DNA进行PCR扩增的步骤中,将洗涤后的FTA卡晾干后放入PCR反应管中进行PCR扩增,扩增采用的上游引物为CGAGGGTCGGCTTATAAAC,下游引物为GGAAAGTTAAGCACCGACC,然后对扩增的产物进行电泳并观察。
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