[发明专利]SmDXS和SmGGPPS双基因共转化提高丹参酮含量的方法无效
申请号: | 201110034229.3 | 申请日: | 2011-01-31 |
公开(公告)号: | CN102174563A | 公开(公告)日: | 2011-09-07 |
发明(设计)人: | 开国银;周聪聪;张昂;鞠冠华;陈莹;郭莺莺 | 申请(专利权)人: | 上海师范大学 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12N15/52;C12N15/54;C12Q1/68;A01H5/00;A01H5/06 |
代理公司: | 上海伯瑞杰知识产权代理有限公司 31227 | 代理人: | 吴瑾瑜 |
地址: | 200234 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及生物技术领域,是一种提高丹参酮含量的方法,用丹参1-脱氧木酮糖-5-磷酸合成酶(SmDXS)和丹参牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶(SmGGPPS)基因构建成SmDXS和SmGGPPS基因的植物双价高效表达载体,遗传转化丹参叶片获得转SmDXS和SmGGPPS基因的丹参毛状根。本发明获得的转基因丹参毛状根中丹参酮含量显著提高,其中一个株系的总丹参酮含量为对照的6.29倍。本发明提供了一种提高丹参毛状根中丹参酮含量的方法,也为生产具重要临床需求的丹参酮提供了一种新型优质原料。 | ||
搜索关键词: | smdxs smggpps 基因 转化 提高 丹参 含量 方法 | ||
【主权项】:
SmDXS和SmGGPPS双基因共转化提高丹参酮含量的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将1‑脱氧木酮糖‑5‑磷酸合成酶基因SmDXS和牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因SmGGPPS插入植物表达载体,构建重组载体;所述的1‑脱氧木酮糖‑5‑磷酸合成酶基因和牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因序列分别为SEQ ID:1和SEQ ID:2的DNA序列;(2)将步骤(1)所获得的重组载体转入发根农杆菌,构建含有重组载体的发根农杆菌;(3)用步骤(2)所得含有重组载体的发根农杆菌介导1‑脱氧木酮糖‑5‑磷酸合成酶基因和牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因转化丹参,获取毛状根;(4)检测步骤(3)毛状根中的1‑脱氧木酮糖‑5‑磷酸合成酶基因和牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因,取筛选结果为阳性的转基因毛状根。
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