[发明专利]检测Thl/Th2细胞因子核糖核酸的相对定量试剂盒

摘要

本发明公开了可用于对Th1/Th2细胞相关细胞因子进行相对定量检测的一条逆转录引物和多条配套扩增的基因特异性引物、试剂盒。试剂盒包括试剂A：5μM逆转录引物50μL；试剂B：20U/μL M-MuLV逆转录酶，50μL；试剂C：5×逆转录缓冲液，200μL含dNTP浓度为5mM(包括dATP、dCTP、dGTP、dTTP)，Tris-HCl浓度为250mM，KCl浓度为250mM，MgCl₂浓度为20mM，50nM DTT；试剂D：2×PCR缓冲液组成，1mL液体中包含100 U taq酶、600nM ROX，Green I dye，2mM dNTPs(包括dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、80mM Tris-HCl、80mM KCl、40mM (NH₄)₂SO₄、6mM MgSO₄；含引物的PCR 8联反应管24条。本发明所提供的整套试剂盒可对Th1/Th2细胞的细胞因子进行相对定量，而且还可对不同类型T细胞的6种细胞因子mRNA片段进行相对定量分析，并依据此结果对个体免疫状态进行评估。

主权项

一条用于逆转录mRNA的共同引物，其特征是一条带标签的核苷酸序列，3’端带11个连续的胸腺嘧啶与mRNA的多聚腺嘌呤特异性互补，核酸序列为SEQID NO.1，可用于逆转录mRNA。