[发明专利]RT-LAMP检测方法在快速检测丙型肝炎病毒载量中的应用无效
申请号: | 201110045349.3 | 申请日: | 2011-02-25 |
公开(公告)号: | CN102649981A | 公开(公告)日: | 2012-08-29 |
发明(设计)人: | 李擎天;熊慧;金维荣;郭晓奎;王颖 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学医学院 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68 |
代理公司: | 上海翼胜专利商标事务所(普通合伙) 31218 | 代理人: | 翟羽 |
地址: | 200025 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开RT-LAMP检测方法在快速检测丙型肝炎病毒载量中的应用,包括以下步骤:(1)选取HCV的特异性基因片段用于LAMP扩增;(2)用于HCV基因扩增的结果判断;用于HCV基因扩增的体系为二步法或者一步法;步骤(2)中在检测时使用Sybgreen染液实时观察,加入梯度浓度的标准品以及阴性血清对照,在紫外灯下每5分钟对标准品、对照及待测样本直接观察,即可获得待测样本的HCV载量。本发明对于硬件设备的要求低,操作简便快捷,适用于现场或基层检测,且本发明既可以用于定性检测HCV病毒的有无,也可以用于HCV病毒载量的初步判断。 | ||
搜索关键词: | rt lamp 检测 方法 快速 肝炎 病毒 中的 应用 | ||
【主权项】:
RT‑LAMP检测方法在快速检测丙型肝炎病毒载量中的应用,包括以下步骤:(1)选取HCV的特异性基因片段用于LAMP扩增;(2)用于HCV基因扩增的结果判断;其特征在于,步骤(1)中用于HCV基因扩增的特异性引物为:F3:GCAGAAAGCGTCTAGCCA;B3:CTCGCAAGCACCCTATCA;FIP:TACTCACCGGTTCCGCAGTTTTTGCAGCCTCCAGGACCCC;BIP:TGGAGATTTGGGCGTGCCTTTTTGCCTTTCGCGACCCAACA;用于HCV基因扩增的体系为二步法或者一步法;步骤(2)中在检测时使用Sybgreen染液实时观察,加入梯度浓度的标准品以及阴性血清对照,在紫外灯下每5分钟对标准品、对照及待测样本直接观察,即可获得待测样本的HCV载量。
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