[发明专利]一种大丽轮枝菌基因敲除的方法无效
| 申请号： | 201110049305.8 | 申请日： | 2011-03-01 |
| 公开（公告）号： | CN102653755A | 公开（公告）日： | 2012-09-05 |
| 发明（设计）人： | 戴小枫;田李;陈捷胤;汪佳妮 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院作物科学研究所 |
| 主分类号： | C12N15/09 | 分类号： | C12N15/09;C12N15/10;C12N15/63;C12N1/15;C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 北京润平知识产权代理有限公司 11283 | 代理人： | 陈小莲;王凤桐 |
| 地址： | 100081 北京市海淀区中关*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供一种大丽轮枝菌基因敲除的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：构建用于同源重组的重组质粒，该重组质粒由载体和同源重组DNA片段组成，所述同源重组DNA片段含有用于替代待敲除基因的外源抗性基因和位于该外源抗性基因两侧的满足同源重组要求的侧翼序列，所述载体含有外源条件致死基因；通过农杆菌介导的方法，将所述重组质粒转化至大丽轮枝菌中进行同源重组，得到转化子，并筛选出阳性转化子。通过上述方法分别对大丽轮枝菌的ADE4和ChsV基因进行敲除，基因敲除转化子在总的转化子中所占比例分别为87％和44％，由此可见，本发明的方法相对现有技术的大丽轮枝菌的基因敲除方法的效率大大提高了。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 大丽轮枝菌 基因 方法 | ||
【主权项】：
一种大丽轮枝菌基因敲除的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：构建用于同源重组的重组质粒，该重组质粒由载体和同源重组DNA片段组成，所述同源重组DNA片段含有用于替代待敲除基因的外源抗性基因和位于该外源抗性基因两侧的满足同源重组要求的侧翼序列，所述载体含有外源条件致死基因；通过农杆菌介导的方法，将所述重组质粒转化至大丽轮枝菌中进行同源重组，得到转化子，并筛选出阳性转化子。
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