[发明专利]一种可以诱导肿瘤免疫反应的海藻酸盐微颗粒的制备方法

摘要

本发明提供一种可以诱导肿瘤免疫反应的海藻酸盐微颗粒的制备方法，利用基因工程技术，构建MIP-3α真核表达质粒并转化肿瘤细胞，通过筛选获得稳定表达MIP-3α的肿瘤细胞。同时培养大肠杆菌并溶于海藻酸盐溶液中，经高温高压消毒后将MIP-3α肿瘤细胞混匀于细菌海藻酸盐溶液中，此后采用雾化器将“MIP-3α肿瘤细胞细菌海藻酸盐溶液”进行雾化，并将雾化颗粒喷入氯化钙溶液中，经过纱网过滤后获得可以注射的MIP-3α肿瘤细胞细菌海藻酸盐微颗粒，“MIP-3α肿瘤细胞细菌海藻酸盐微颗粒”在体外培养环境中可以表达分泌MIP-3α蛋白。将微颗粒注入小鼠膜腔，在肿瘤模型中证实有效抑制肿瘤生长和转移，具有明显的治疗肿瘤的作用。

主权项

一种可以诱导肿瘤免疫反应的海藻酸盐微颗粒的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)、构建MIP‑3α真核表达质粒并将其转染肿瘤细胞；(2)、通过G418筛选获得可以稳定表达MIP‑3α的肿瘤细胞株，称为MIP‑3α肿瘤细胞；(3)、培养大肠杆菌，将大肠杆菌溶于质量浓度为1.5％的海藻酸盐溶液，获得细菌海藻酸盐溶液；(4)、将步骤(2)的MIP‑3α肿瘤细胞混匀于经高温高压消毒后的步骤(3)的细菌海藻酸盐溶液中，此时获得“MIP‑3α肿瘤细胞细菌海藻酸盐溶液”；(5)、通过雾化器将步骤(4)的“MIP‑3α肿瘤细胞细菌海藻酸盐溶液”进行雾化，并将雾化颗粒喷入250mMol/L的氯化钙溶液中，经过孔径大小不同纱网过滤后获得直径50‑300μm并且可以注射的“MIP‑3α肿瘤细胞细菌海藻酸盐微颗粒”。