[发明专利]基于脂质体包埋多巴胺的电化学免疫检测方法无效
申请号: | 201110075838.3 | 申请日: | 2011-03-28 |
公开(公告)号: | CN102226810A | 公开(公告)日: | 2011-10-26 |
发明(设计)人: | 仲召阳;王东;卿毅;戴楠;李梦侠;关伟;金丰;单锦露 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第三军医大学第三附属医院 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N27/48;G01N27/30 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 逯长明 |
地址: | 400038 重*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于包埋多巴胺的小单层脂质体的电化学免疫检测方法。该检测方法通过胃泌素前体释放肽(ProGRP)抗体与待测样品中胃泌素前体释放肽(ProGRP)发生特异性免疫反应,加入包埋多巴胺的小单层脂质体和胃泌素前体释放肽(ProGRP)抗体的共耦合物,经表面活性剂破乳,释放出电活性分子多巴胺,利用多壁碳纳米管(MWNT)修饰玻碳电极作为工作电极,通过检测多巴胺的线性扫描伏安峰电流信号强度来检测待测样品中胃泌素前体释放肽的浓度。本发明提供的电化学免疫检测方法线性响应范围为50~1000pg/ml,检测下限为16pg/ml,特异性好,灵敏度高,对小细胞肺癌(SCLC)的诊断具有重要意义。 | ||
搜索关键词: | 基于 脂质体 包埋 多巴胺 电化学 免疫 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种电化学免疫检测方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤1:制备包埋多巴胺的小单层脂质体与待检蛋白抗体共耦合物;步骤2:向固载了所述待检蛋白抗体的微孔板中加入含有不同浓度待检蛋白的标准品充分结合,除去非特异性结合位点,向微孔板中加入所述包埋多巴胺的小单层脂质体与待检蛋白抗体共耦合物充分结合,加入表面活性剂在室温下破乳,制得检测溶液;从微孔板中取所述检测溶液,转移到电化学测试池中,采用线性扫描伏安法,进行电化学发光测试,以标准品中待检蛋白的浓度和相应的电化学峰峰电流绘制标准曲线;步骤3:向固载了待检蛋白抗体的微孔板中加入待检样品温育,如步骤2进行电化学发光测试,测得待测样品的电化学峰峰电流强度,从标准曲线上读取对应的待检蛋白的浓度。
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