[发明专利]一种检测血液中转移肝癌细胞的试剂盒、标志物及方法

摘要

本发明公开了属于医学肿瘤学领域的一种利用甲基化原理检测血液中转移肝癌细胞的试剂盒、标志物及其检测方法。该标志物为肝癌细胞特异性表达降低的基因ASS基因或ASL基因，其启动子区和第一外显子区包含至少一个被甲基化的CpG岛。该试剂盒包括针对ASS基因和ASL基因的各5条特异性专用引物，通过甲基化特异性PCR方法检测ASS基因和ASL基因甲基化情况，进而推测待检样品中是否含有转移肝癌细胞。该方法具有专一性强，反应灵敏的特点，对于了解并掌握如何早期发现肝癌意义重大。

主权项

一种利用甲基化原理检测血液中转移肝癌细胞的试剂盒，包括dNTP、10x PCR buffer、MgCl2、ddH2O，其特征在于，还包括标准血液DNA、热启动TaqDNA聚合酶、引物F 1、引物B1、引物F 2、引物B2、引物B3、引物R1、引物L1、引物R2、引物L2、引物L3；上述引物用于做甲基化特异性PCR，PCR时，引物的配对方案为：引物F1、B1配对，引物F1、B2配对，引物F2、B1配对，引物F2、B3配对，用于检测ASS基因(GeneBank NG_011542，精氨酸代琥珀酸合成酶基因)甲基化情况；引物R1、L1配对，引物R1、L2配对，引物R2、L3配对，用于检测ASL基因(GeneBank NG_009288，精氨酸代琥珀酸裂解酶基因)甲基化情况。