[发明专利]针对三种甘薯病毒的融合基因及其干涉载体有效

专利信息
申请号: 201110079993.2 申请日: 2011-03-31
公开(公告)号: CN102206661A 公开(公告)日: 2011-10-05
发明(设计)人: 张振臣;秦艳红;张德胜;张磊;乔奇;田雨婷;郑文明 申请(专利权)人: 河南省农业科学院
主分类号: C12N15/62 分类号: C12N15/62;C12N15/82;C12N15/66;A01N61/00;A01P1/00
代理公司: 郑州大通专利商标代理有限公司 41111 代理人: 张爱军
地址: 450002 *** 国省代码: 河南;41
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摘要: 发明涉及一种针对三种甘薯病毒的融合基因及其干涉载体。针对三种甘薯病毒的融合基因序列为SEQ1,命名为SPFLG。其干涉载体构建时,先设计SPFLG-XbaI和SPFLG-SpeI以及SPFLG-KpnI和SPFLG-ClaI两对引物,将SPFLG基因克隆到T载体上,以SPFLG-T为模板,分别以两对引物进行PCR扩增,将获得的目的基因SPFLG分别用XbaI和SpeI及KpnI和ClaI酶切后,以反向重复的方式分别克隆到pBlueNiRIntron载体的内含子两侧;然后利用XbaI和KpnI进行双酶切,回收目的基因的片段,将其克隆到中间载体pROK219上;用EcoRI和HindIII酶切pROKSPFLG,回收包括35S启动子、反向重复片段和NOS终止子的目的片段,克隆到植物表达载体pBIN19上,命名为pBINSPFLG。试验表明,本发明构建的RNA干涉载体对SPFMV、SPLV和SPVG三种病毒有明显的干扰作用,为培育同时抗三种病毒的转基因甘薯奠定了基础。
搜索关键词: 针对 甘薯 病毒 融合 基因 及其 干涉 载体
【主权项】:
针对三种甘薯病毒的融合基因,其特征在于,所述融合基因的序列为SEQ1,命名为SPFLG。
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