[发明专利]一种检测东南亚缺失型α地中海贫血的方法及试剂盒

摘要

本发明涉及生物技术领域，公开了一种检测东南亚缺失型α地中海贫血的方法及试剂盒。本发明所述检测方法为在东南亚缺失型α地中海贫血缺失片段断端的两侧设计一对引物Fd5和Rd3及探针Prob-D，在缺失片段5′端设计一条反向引物Rq5及探针Prob-Q，提取待测样品DNA，以待测样品DNA为模板进行实时荧光PCR反应，然后根据实时荧光PCR扩增曲线分析待测样品。本发明所述试剂盒包括引物Fd5、Rd3和Rq5与标记不同波长报告荧光基团的Prob-D和Prob-Q。本发明所述检测方法根据荧光信号强度在扩增的同时进行检测，节省了时间，提高了灵敏度，是一种简单、快捷，灵敏度高，易于推广的检测方法。

主权项

一种检测东南亚缺失型α地中海贫血的方法，其特征在于，针对Genebank登录号为AE006462的α类珠蛋白基因，在东南亚缺失型α地中海贫血缺失片段断端的两侧设计一对引物Fd5和Rd3及探针Prob‑D，在缺失片段5′端设计一条反向引物Rq5及探针Prob‑Q，其中，所述引物Fd5为第155115至第155755位之间长度为15bp～30bp的核苷酸序列，Rd3为与第174721至第175321位核苷酸互补的长度为15bp～30bp的核苷酸序列，Rq5为与第155395至第155895位核苷酸互补的长度为15bp～30bp的核苷酸序列，所述Prob‑D为与第174780至第174900位核苷酸互补的长度为15bp～30bp的核苷酸序列，Prob‑Q为与第155533至第155653位核苷酸序列区域互补的长度为15bp～30bp的核苷酸序列，Prob‑D和Prob‑Q标记不同波长的报告荧光基团；提取待测样品DNA，以待测样品DNA为模板进行实时荧光PCR反应，根据实时荧光PCR的扩增曲线分析待测样品。