[发明专利]一种植物单拷贝基因的检测方法

摘要

本发明涉及一种基于量子点荧光原位杂交的植物单拷贝基因检测方法。通过制备量子点偶联的DNA作为探针，按照传统的荧光原位杂交方法，在间期核、染色体或DNA纤维等上进行植物单拷贝基因的杂交检测。该方法采用直接标记的方法，省去了抗体检测的过程，而且由于量子点荧光强度高、抗光漂，提高了杂交的灵敏度和分辨率，可以快速、有效进行植物单拷贝基因的定位，可广泛应用于物理图谱的绘制，分析基因组的组成、结构、重排以及进化关系等。

主权项

一种植物单拷贝基因的检测方法，其特征在于：制备植物的间期核、中期染色体或染色质纤维；制备量子点偶联的DNA作为探针；按照传统的荧光原位杂交方法，进行植物单拷贝基因的杂交，然后检测；所述探针的制备具体包括如下步骤：A、根据所要检测的目标基因，设计并合成一对寡核苷酸引物，将其中一个引物的5’端连上5’‑NH2‑(CH2)6‑TTTTTT，并通过氨基和量子点上的羧基进行化学反应，偶联到量子点表面；  B、将偶联了量子点的寡核苷酸引物与另外一个引物，以及含有目的片段的DNA模板一起加入聚合酶链式反应体系中，通过聚合酶链式反应得到量子点偶联的长链DNA分子；  C、通过琼脂糖凝胶电泳分离聚合酶链式反应得到的产物，得到单个量子点偶联的单个长链DNA分子，将其作为探针。