[发明专利]一种花曲柳的微繁方法

摘要

一种花曲柳的微繁方法，它涉及一种微繁方法。它解决了花曲柳苗木繁殖中繁殖周期长、增殖效率低、后代遗传稳定性差的问题。方法：一、取花曲柳种子进行消毒处理，取合子胚的单片子叶进行培养并得到子叶形体细胞胚；二、子叶形体细胞胚进行成熟培养；三、经过成熟培养的子叶形体细胞胚进行萌发培养，得再生植株；四、将再生植株移植到栽培基质中培养至新叶完全展开后，去掉覆盖的塑料薄膜即完成。本发明苗木繁殖周期短、繁殖速度快(培养60～70天即可)，增殖效率高(每1个外植体可产生15～20个体细胞胚)，体细胞胚萌发率高达87％～89.55％，再生植株移栽成活率达75％～80％，且可大量生产与母本具有相同优良性状的再生植株。

主权项

一种花曲柳的微繁方法，其特征在于花曲柳的微繁方法按以下步骤实现：一、取花曲柳的种子进行消毒处理，剥离出合子胚，切取合子胚的单片子叶接种到含0.25～0.75mg/L细胞分裂素、0.5～2.0mg/L生长素、100～700mg/L的酸性水解酪蛋白、30～100g/L蔗糖和5～7g/L琼脂的诱导培养基上，在温度为20～30℃、湿度为40％～70％、无光照的条件下培养2～4周，得子叶形体细胞胚；二、将子叶形体细胞胚接种到含30～100g/L蔗糖和5～7g/L琼脂的成熟培养基上，在温度为20～30℃、湿度为40％～70％、光照强度为20～60μmol·m‑2·s‑1、每天光照16～20h的条件下培养3～5周；三、将经过成熟培养的子叶形体细胞胚接种到含30～100g/L蔗糖和5～7g/L琼脂的萌发培养基上，在温度为20～30℃、湿度为40％～70％、光照强度为20～60μmol·m‑2·s‑1、每天光照16～20h的条件下培养1～7周，得再生植株；四、将生根并具有3片以上叶片的再生植株用清水洗净根系附着的培养基，再移植到栽培基质中并浇透水，在温度为20～30℃、湿度为60％～80％、光照强度为40～100μmol·m‑2·s‑1、每天光照12～18h的条件下用塑料薄膜覆盖容器口培养至新叶完全展开后，去掉覆盖的塑料薄膜，得花曲柳苗木，即完成花曲柳的微繁；其中步骤一中诱导培养基为MS1/2培养基、MS培养基、1/2MS培养基、DKW培养基或WPM培养基，pH值均为5～6；步骤一中细胞分裂素为苄基腺嘌呤、玉米素、激动素或噻苯隆；步骤一中生长素为2，4‑二氯苯氧乙酸、萘乙酸或吲哚丁酸；步骤二中成熟培养基为MS1/2培养基、MS培养基、1/2MS培养基、DKW培养基或WPM培养基，pH值均为5～6；步骤三中萌发培养基为MS1/2培养基、MS培养基、1/2MS培养基、DKW培养基或WPM培养基，pH值均为5～6；步骤四中栽培基质按体积份数比由5份的草炭土、4份的蛭石和1份的珍珠岩组成。