[发明专利]一种酿酒酵母gsh1缺失突变株的构建方法及应用有效
申请号: | 201110109262.8 | 申请日: | 2011-04-26 |
公开(公告)号: | CN102296033A | 公开(公告)日: | 2011-12-28 |
发明(设计)人: | 谢志雄;庞代文;李勇 | 申请(专利权)人: | 武汉大学 |
主分类号: | C12N1/18 | 分类号: | C12N1/18;C12N15/09;C12Q1/02;C12R1/865 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人: | 王敏锋 |
地址: | 430071*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种酿酒酵母gsh1缺失突变株的构建方法及应用,步骤是:A、获得Δgsh1突变株:酿酒酵母基因同源重组敲除原理、引物设计、敲除片段转化方法按照文献所描述的方法进行(Yeast,1998,14:953-962),该方法是目前酿酒酵母中基因敲除的通用方法;依据酿酒酵母gsh1基因序列设计引物:上游引物P1和下游引物P2;利用上游引物P1和下游引物P2对质粒pFA6a-Kan MX6进行PCR扩增,获得含酿酒酵母gsh1基因上下游序列的敲除片段;通过醋酸锂/PEG的转化方法将敲除片段导入酿酒酵母BY47421菌株细胞,筛选得到酿酒酵母的Δgsh1突变株YJL101C。利用微生物遗传学方法构建酿酒酵母细胞Δgsh1突变株,再利用突变株进行氯化镉等重金属细胞毒性的检测,以提高细胞毒性检测灵敏度,方法易行,操作简便。 | ||
搜索关键词: | 一种 酿酒 酵母 gsh1 缺失 突变 构建 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种酿酒酵母的gshl缺失突变株,其特征在于:酿酒酵母的Δgshl突变株YJL101C(Saccharomyces cerevisiae YJL101C),CCTCC No:M 2011130。
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