[发明专利]一种快速筛选钙离子通道拮抗剂的方法

摘要

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种高通量筛选钙离子通道拮抗剂的方法。一种高效筛选钙离子通道拮抗剂的方法，该方法包括以下步骤：1)制作稳定的带钙离子通道的细胞株；2)剂量效应标准曲线的制备；3)筛选。本发明是利用钙离子对细胞的毒性对钙离子通道的拮抗剂和调节剂进行快速高频筛选，一天可获得几百甚至上千个实验数据，成本大大降低，操作人员在简单训练后即可掌握。因此，与现有技术相比，本发明的方法不仅在速度上具有较大的优势，而且可使成本由原来的一个数据点$50左右降至$1左右，具有很大的价格优势和发展前景。

主权项

一种高效筛选钙离子通道拮抗剂的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：1)   制作稳定的带钙离子通道的细胞株；2)   剂量效应标准曲线的制备：将等量的带钙离子通道的细胞株滴入细胞培养板的各个孔内，再加入经梯度稀释的钙离子通道阻断剂，以此同时加入1μM Bay K, 培养至少24小时后测量细胞的存活率，以细胞存活率对钙离子通道阻断剂Nitrendipine的浓度绘制曲线，得到剂量效应标准曲线；3)   筛选：将带钙离子通道的细胞株滴入细胞培养板的各个孔内，每个孔内带钙离子通道的细胞株的量与步骤2)中带钙离子通道的细胞株的量的加入量相同，再向孔内加入待筛选化合物，得到的数值与剂量效应标准曲线对照，确定其是否对钙离子通道有阻断作用。