[发明专利]一种枯草芽孢杆菌培养制剂生产方法及其开放式发酵方法

摘要

本发明公开了一种枯草芽孢杆菌培养制剂生产方法及其开放式发酵方法。该生产方法包括以下步骤：种子培养基的制备、种子培养基的发酵、液体发酵培养基的制备、菌种的液体发酵、枯草芽孢杆菌制剂中培养基成分的配置及灭菌、枯草芽孢杆菌培养制剂的生产。本发明根据菌株的特性，将枯草芽孢杆菌菌种与培养基成分混合制成枯草芽孢杆菌培养制剂，采用无需灭菌、接种和密闭培养条件的开放式液体培养方法进行小规模枯草芽孢杆菌的发酵培养，不仅方便枯草芽孢杆菌制剂用户的使用，更能大幅降低单位活菌数的生产成本，促进我国枯草芽孢杆菌微生态制剂在饲料和水产行业的使用，加速我国发酵床养殖技术的推广。

主权项

一种枯草芽孢杆菌培养制剂生产方法，其特征是，包括下述步骤：a枯草芽孢杆菌种子培养基的制备：以三角瓶盛装不高于总容量20％的适于细菌生长的培养基，121℃高压灭菌30分钟，冷却至室温；b枯草芽孢杆菌种子培养基的发酵：将斜面保存的枯草芽孢杆菌菌种，接种至所述步骤a制备的枯草芽孢杆菌种子培养基中，37℃150rpm摇床振荡培养8‑12小时，制成大罐发酵菌种；c枯草芽孢杆菌液体发酵培养基的制备：发酵罐空消后，加入不高于总容积70％的枯草芽孢杆菌液体发酵培养基，121℃实消灭菌30min以上，冷却至室温；d枯草芽孢杆菌菌种的液体发酵：将步骤b中发酵完成的大罐发酵菌种接种至步骤c中制备的枯草芽孢杆菌液体发酵培养基中，接种量为枯草芽孢杆菌液体发酵培养基体积的0.05％‑0.15％；发酵罐中37℃发酵24小时；发酵完成后的枯草芽孢杆菌发酵液即为制备好的枯草芽孢杆菌制剂中的枯草芽孢杆菌菌种；或者将发酵完成的枯草芽孢杆菌发酵液加入辅料以喷雾干燥的方法制成菌种干粉；e枯草芽孢杆菌制剂中培养基成分的配置：配置用于枯草芽孢杆菌培养的培养基，于粉碎搅拌机中粉碎为120目以上的粉状颗粒并搅拌均匀后装袋；f枯草芽孢杆菌培养制剂中培养基成分的灭菌：采用高压蒸汽灭菌法或者Co60辐照灭菌法对所述步骤e中的培养基进行灭菌后待用；g枯草芽孢杆菌培养制剂混合包装产品的生产：将步骤d中的枯草芽孢杆菌发酵液与步骤f中灭菌后的培养基，按照8∶92的质量比混合，控制含水量＜15％，然后分装为枯草芽孢杆菌培养制剂的真空包装产品；或者将步骤d中的菌种干粉与步骤f中灭菌后的培养基，按照1∶99的质量比混合，控制含水量＜8％，然后分装为枯草芽孢杆菌培养制剂的真空包装产品。