[发明专利]伯克氏菌的制备及其在高效溶磷微肥中的应用

摘要

本发明涉及一种伯克氏菌的制备及其在高效溶磷微肥中的应用，其特征在于具体步骤如下：（1）采集种植玉米的贫磷土壤放入塑料袋中，置于4℃的冰箱保存；（2）菌株（伯克氏菌）的分离及筛选；（3）伯克氏菌溶磷能力的测定；（4）菌株的鉴定：对筛选获得的菌株进行了DNA测序和16SrRNA系统发育树构建，鉴定为伯克氏菌。其对壤难溶性磷活化的活化率可以达到10.94%～13.03%，P素利用率达到21.75%－37.98%，在玉米上应用可减少三分之一的磷肥用量。溶磷微生物肥料具有成本低、效果好、增强植物抗病能力、不污染环境、充分利用潜在磷素资源等优点。

主权项

伯克氏菌的制备，其特征在于具体步骤如下：土壤样本的采集：（1）采集种植玉米的贫磷土壤放入塑料袋中，置于4℃的冰箱保存；（2）菌株（伯克氏菌）的分离及筛选，筛选培养基：葡萄糖10.0克，(NH4)2SO4 0.5克，NaCl 0.3克，KCl 0.3克，MgSO4·7H2O 0.3克，FeSO4·7H2O 0.03克，MnSO4·4H2O 0.03克，Ca3(PO4)2 10.0克，酵母粉 0.5 g 琼脂粉 15 g， PH值7.0～7.2，水 1000 mL；在121℃条件下灭菌20min然后制作平板固体培养基备用；将土壤样品在无菌条件下分别进行10倍梯度稀释，制成10－1～10－6系列稀释液，然后分别取0.1ｍＬ不同稀释度的样品以平板划线法涂布于以上制作的筛选平板培养基，28℃培养３ｄ后，选取产生透明圈（溶磷圈）较大的菌落转接到溶磷平板培养上，菌株纯化后，挑出，斜面保藏；（3）伯克氏菌溶磷能力的测定:以上述溶磷培养基为主要成分制作液体培养基，然后分别量取100 mL分装在250 mL三角瓶中，加入1 mL已培养24 h的菌液，28°C~30°C，120 r/min摇床培养，分别在48 h、72 h、96 h及120 h，取上清液进行钼锑抗比色法测定菌株溶解无机磷能力；（4）菌株的鉴定：对筛选获得的菌株进行了DNA测序和16S rRNA系统发育树构建，鉴定为伯克氏菌。