[发明专利]一种显微测定肌原纤维小片化指数的方法

摘要

本发明公开了一种显微测定肌原纤维小片化指数的方法，将去除肉样中的可视脂肪和结缔组织的肉样放入匀浆器，加入2℃分离介质高速低温均浆，然后缓慢倒出上层清液，保留沉淀物，沉淀物在沉淀过程又加入2℃分离介质，用搅捧制成悬液；制得的悬液重复上述离心步骤，倒出上层清液，继续保留沉淀物，沉淀物中加入2℃分离介质于漩涡混合器上混匀，通过200目筛网滤去结缔组织，再加2℃分离介质来帮助肌原纤维通过筛孔，调整悬液体积为10mL，混匀，吸取1μL肌原纤维悬液滴于云母片上，自然风干，直接进行原子力显微镜观察，并进行肌原纤维小片计数。避免了现有方法吸光光度法中肌原纤维小片的大小对吸光值的影响，减少了偶然误差。

主权项

一种显微测定肌原纤维小片化指数的方法，其特征在于，包括下列步骤：称取适量已去除肉样中可视脂肪和结缔组织的被测样本，放入匀浆器中，高速低温均浆1min，加入10mL的2℃分离介质，在4℃低温离心机3000g下离心15min；然后将离心后的匀浆液缓慢倒出上层清液，保留沉淀物；在沉淀物中再加入10mL的2℃分离介质，用搅捧制成悬液；将制得的悬液重复上述离心步骤，再倒出上层清液，继续保留沉淀物；在沉淀物加入2.5mL的2℃分离介质于漩涡混合器上混匀，通过200目筛网滤去结缔组织，再加2.5mL的2℃分离介质来帮助肌原纤维通过筛孔；将通过筛孔的肌原纤维悬液，调整至体积为10mL，混匀，吸取1μL肌原纤维悬液滴于云母片上，自然风干，得到肌原纤维样片；将肌原纤维样片在原子力显微镜下观察，并进行肌原纤维小片计数。