[发明专利]蝴蝶文心兰优质种苗快速繁殖方法

摘要

本发明公开了蝴蝶文心兰(Pschopsis)种苗的组织培养繁殖方法，旨在提供一种繁殖速度快，可在短期内获得大量试管苗，对母株不会产生损伤，能保持母株优良性状的蝴蝶文心兰的组织培养繁殖方法。本方法包括选择生长旺盛的蝴蝶文心兰优良株系的花茎带节切段为外植体，对外植体进行消毒，在花梗苗诱导培养基中进行不定芽的诱导，再将花梗苗茎尖接入原球茎诱导和增殖培养基中进行原球茎的诱导和继代增殖，然后在原球茎分化培养基上进行原球茎的分化，再将由原球茎能分化出小苗接种到壮苗培养基上培养，当试管苗长至3～4厘米高时，在温室中的自然光照下炼苗7～14天，取出试管苗，洗掉根部培养基，栽入树皮、兰石和泥炭的混合基质中，进一步栽培成种苗，移栽的成活率90-98％。本发明为蝴蝶文心兰的种苗的繁殖开辟了一条新的途径，能为市场提供大量的蝴蝶文心兰种苗。

主权项

一种蝴蝶文心兰种苗繁殖方法，其特征包括以下的步骤：(1)开花时选取生长健壮的蝴蝶文心兰的带节花梗为外植体；(2)将外植体依次用酒精浸泡，升汞溶液消毒，无菌水漂洗后接种到花梗苗诱导培养基上培养，30～40天时能诱导花梗苗的产生。所述的花梗苗诱导培养基每升含花宝1号(HYPONeX 1)1～2g，肌醇80～120mg，甘氨酸1.5～2.5mg，盐酸硫胺素(VB1)0.05～0.2mg，盐酸吡哆醇(VB6)0.4～0.8mg，烟酸0.4～0.8mg，柠檬酸钠50～200mg，萘乙酸(NAA)0.2～1mg，10～20％的椰子汁，蔗糖15～30g，琼脂6～7g。(3)将由花梗诱导的小苗转移到类原球茎诱导培养基培养，40～60天能诱导类原球茎的形成，在相同的培养基上能进行类原球茎的增殖，增殖倍数3～5倍，增殖周期30～40天。所述的类原球茎诱导和增殖培养基为每升含花宝2号1～2g，肌醇80～120mg，甘氨酸1.5～2.5mg，盐酸硫胺素(VB1)0.05～0.2mg，盐酸吡哆醇(VB6)0.4～0.8mg，烟酸0.4～0.8mg，柠檬酸钠50～200mg，6‑苄基腺嘌呤(6‑BA)2～5mg，萘乙酸(NAA)0.2～1mg，10％～20％的椰子汁，蔗糖15～30g，琼脂6～7g。(4)将增殖而来的类原球茎接种到分化培养基培养，40～50天能分化出小苗。所述的原球茎分化培养基为每升含花宝1号1～2g，肌醇80～120mg，甘氨酸1.5～2.5mg，盐酸硫胺素(VB1)0.05～0.2mg，盐酸吡哆醇(VB6)0.4～0.8mg，烟酸0.4～0.8mg，萘乙酸(NAA)0.5～1.5mg，活性炭0.5～1g，蔗糖15～30g，琼脂6～7g。(5)将类原球茎分化出的小植株接种到壮苗培养培养，40～50天能试管苗的形成，所述的壮苗培养基为每升含花宝1号1～2g，花宝2号1～2g，肌醇80～120mg，甘氨酸1.5～2.5mg，盐酸硫胺素(VB1)0.05～0.2mg，盐酸吡哆醇(VB6)0.4～0.8mg，烟酸0.4～0.8mg，萘乙酸(NAA)1～2mg，蔗糖20～30g，香蕉汁50～100g，活性碳0.5～1g，琼脂6～7g。(6)将试管苗在温室的自然光下炼苗，然后洗净根部的培养基，在用树皮、兰石和泥炭的混合基质(体积比2∶2∶1)中栽培，得到种苗。上述步骤(2)～(5)中培养基pH 5.4～5.6，培养温度24～28℃，光照的照度为1500～2000lx，光照时间为12～16小时/天。