[发明专利]鸭瘟病毒gG基因重组原核表达蛋白及其制备方法与应用

摘要

本发明涉及检测鸭瘟病毒抗体的gG基因重组原核表达检测抗原蛋白以及它的制备方法与应用，该抗原蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO:1所示，其制备方法包括：鸭瘟病毒gG的DNA片段的获得、重组原核表达质粒pET32a-gG的获得、鸭瘟病毒gG基因重组原核表达蛋白的获得三步骤；其可作为制备鸭瘟病毒抗原及亚单位疫苗运用。

主权项

鸭瘟病毒gG基因重组原核表达蛋白的制备方法，具体包括以下步骤：A鸭瘟病毒gG的DNA片段的获得以鸭瘟病毒毒株基因组DNA为模板对gG基因进行PCR扩增，得鸭瘟病毒 gG基因片段，与pMD18 T 的连接，得pMD18 gG，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，其上游引物如SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列，下游引物如SEQ ID NO:4所示的核苷酸序列；B 重组原核表达质粒pET32a gG的获得限制性内切酶BamHⅠ和XhoⅠ分别双酶切pMD18 gG质粒和原核表达载体pET32a(+),并连接, 得重组原核表达质粒pET32a gG； C 鸭瘟病毒gG基因重组原核表达蛋白的获得 将步骤B所得重组原核表达质粒pET32a gG转化至表达菌株BL21(DE3)进行诱导表达，得鸭瘟病毒gG基因重组原核表达蛋白。