[发明专利]三重一步法RT-PCR同时检测烟草上三种病毒的方法有效
申请号: | 201110198507.9 | 申请日: | 2011-07-15 |
公开(公告)号: | CN102242224A | 公开(公告)日: | 2011-11-16 |
发明(设计)人: | 杨军;张俊祺;罗朝鹏;王燃;李锋;金立锋;宋纪真;林福呈;翟妞;周会娜 | 申请(专利权)人: | 中国烟草总公司郑州烟草研究院 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/94 |
代理公司: | 郑州中民专利代理有限公司 41110 | 代理人: | 姜振东 |
地址: | 450001 *** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 三重一步法RT-PCR同时检测烟草上三种病毒的方法,其特征在于:是同时检测烟草普通花叶病毒、马铃薯Y病毒和黄瓜花叶病毒的方法,该方法包括甄别比对病毒基因组中保守区域,人工筛选合成适用于三种病毒病复合RT-PCR特异性引物;分析获得TMV、PVY、CMV侵染烟叶样本;整合反转录和PCR反应所需酶和缓冲液,通过反应条件优化,建立基于一步法RT-PCR复合检测烟叶感染TMV、PVY、CMV的方法。本发明所采用的三重一步法RT-PCR反应,具有操作简便、省时省力、结果可靠、成本低廉的优点,同时可有效减少操作过程中造成样品交叉污染的可能性,对于烟草农业生产中TMV、PVY、CMV的监测监控具有广泛的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 三重 一步法 rt pcr 同时 检测 烟草 上三种 病毒 方法 | ||
【主权项】:
三重一步法RT‑PCR同时检测烟草上三种病毒的方法,其特征在于:是同时检测烟草普通花叶病毒、马铃薯Y病毒和黄瓜花叶病毒的方法,该方法包括甄别比对病毒基因组中保守区域,人工筛选合成适用于三种病毒病复合RT‑PCR特异性引物;分析获得TMV、PVY、CMV侵染烟叶样本;整合反转录和PCR反应所需酶和缓冲液,通过反应条件优化,建立基于一步法RT‑PCR复合检测烟叶感染TMV、PVY、CMV的方法。
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