[发明专利]一种隐性混合池测序基因克隆方法无效
申请号: | 201110216454.9 | 申请日: | 2011-07-29 |
公开(公告)号: | CN102899315A | 公开(公告)日: | 2013-01-30 |
发明(设计)人: | 彭海;张静;周俊飞;章伟雄 | 申请(专利权)人: | 江汉大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/68 |
代理公司: | 北京三高永信知识产权代理有限责任公司 11138 | 代理人: | 孟阿妮 |
地址: | 430056 湖北省武汉市*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种隐性混合池测序基因克隆方法。此方法包括以下步骤:亲本杂交构建分离群体;按个体目标性状的差异对分离群体分池,通过高通量测序亲本获得显性与隐性亲本特异位点,与隐性混合池测序结果比较获得候选基因;富集隐性混合池中候选基因并重测序克隆目标基因。本发明以测序为基础,可用于任何物种,直接克隆基因本身。采用本发明的方法,工作量大为减少,速度大为加快,而且降低了风险。 | ||
搜索关键词: | 一种 隐性 混合 池测序 基因 克隆 方法 | ||
【主权项】:
一种隐性混合池测序基因克隆方法,其特征在于,包括以下步骤:亲本杂交构建分离群体;按每个个体目标性状的差异对分离群体分池,获得隐性池,通过对亲本的高通量测序获得显性与隐性亲本特异位点,与隐性混合池测序结果比较获得候选位点;通过PCR检测隐性池中每一基因型候选位点,或通过富集隐性池中候选位点后重测序的方式确定目标位点;PCR扩增克隆目标基因,并通过遗传互补实验验证所克隆基因的功能。
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