[发明专利]利用卡那霉素抗性基因作为筛选标记对麻疯树进行基因转化的方法有效
| 申请号： | 201110237660.8 | 申请日： | 2011-08-18 |
| 公开（公告）号： | CN102304543A | 公开（公告）日： | 2012-01-04 |
| 发明（设计）人： | 王梅珍;孙怀娟;许文钊;潘文欢;李耿光 | 申请（专利权）人： | 普罗米绿色能源（深圳）有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H4/00;A01H5/00 |
| 代理公司： | 深圳市维邦知识产权事务所 44269 | 代理人： | 黄莉 |
| 地址： | 518057 广东省深圳市南山*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种利用卡那霉素抗性基因作为筛选标记对麻疯树进行基因转化的方法，包括以下步骤：制备麻疯树外植体以及农杆菌液，外植体经农杆菌浸染后进行共培养；共培养后的外植体经脱菌后接入筛选培养基C13KC进行培养，从而获得抗性愈伤组织；将抗性愈伤组织转入分化培养基SR13KC，分化出抗性不定芽；以及将抗性不定芽转入生根培养基R2KC，从而获得转基因植株。利用本发明的方法，使利用农杆菌介导对麻疯树的遗传转化操作简便，价格低廉，为导入功能基因对麻疯树进行遗传改良，获得高产，高油，抗寒等新品种，奠定了良好的基础。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 卡那霉素 抗性 基因 作为 筛选 标记 麻疯树 进行 转化 方法 | ||
【主权项】：
一种利用卡那霉素抗性基因作为筛选标记对麻疯树进行基因转化的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤（1），分别制备麻疯树外植体以及农杆菌菌液，再将外植体经农杆菌液浸染后进行共培养；步骤（2），将共培养后的外植体脱菌后接入筛选培养基C13KC进行培养，从而获得抗性愈伤组织，所述筛选培养基C13KC是含有1.0‑3.0mg/L的6‑苄基嘌呤、0.25‑1.0mg/L的3‑吲哚丁酸、1‑50 mg/L的卡那霉素以及50‑200mg/L的特美汀的MS培养基；步骤（3），将抗性愈伤组织转入分化培养基SR13KC进行培养，分化出抗性不定芽，所述分化培养基SR13KC是含有1.0‑3.0mg/L的6‑苄基嘌呤、0.25‑1.0mg/L的3‑吲哚丁酸、1‑50mg/L的卡那霉素以及50‑200mg/L的特美汀的MS培养基；以及步骤（4），将抗性不定芽转入生根培养基R2KC中进行培养，从而获得转基因植株，所述生根培养基R2KC是含有0.1‑1.0mg/L的3‑吲哚丁酸，1‑50mg/L的卡那霉素，50‑200mg/L的特美汀的1/2MS培养基。
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